常見細胞轉染技術原理步驟和常見問題解答
小 M 敲黑板�。∨笥褌儯遣皇峭四昵拔覀兎窒淼膶嶒瀸毜淞�！不都告訴你們細胞轉染的一大法寶了嗎！趕緊搬好小板凳跟著我一起復習一下。
細胞轉染實驗是生物學實驗中較為基礎的實驗，主要指將 DNA/RNA 導入真核細胞。細胞轉染方法五花八門，常見的可分為化學法、物理法和病毒法。
先前小 M 已經介紹過各種轉染方法的優缺點了 (見 “六合心法” 有三式~)，在傳統的轉染方法 (如磷酸鈣法、電穿孔法、病毒法等) 轉染效率低、細胞毒性大、重復性差的情況下，以 Lipo3000 為主的陽離子脂質體轉染試劑脫穎而出，一度成為轉染界的“熱門選手”。但是它貴��！稍一不慎，人財兩空，哦不，是細胞和試劑都沒了，豈是一個慘字了得。
圖 1. 常見轉染技術原理
想要高效又價美的轉染試劑嗎？
MCE 重磅推出的高性價比 PolyFast Transfection Reagent(HY-K1014)，宿主范圍廣、轉染效率高、細胞毒性小，最最最關鍵的是價格只有 Lipo3000 五分之一�。�！Lipo3000 五分之一�。�！Lipo3000 五分之一�。。�嘿嘿，重要的事情說三遍。
圖 2. 細胞轉染步驟
小白: PolyFast Transfection Reagent 也是屬于陽離子脂質體轉染試劑嗎？
小M: 不是哦！PolyFast Transfection Reagent 屬于陽離子聚合物轉染試劑，在確保高轉染效率的同時，對細胞毒性更�。�
小白: 那可以使用有血清的培養基嗎？
小M: 可以使用有血清的培養基。但對于一些難轉染細胞，建議剛開始轉染前使用無血清培養基，至少轉染一小時后再換成有血清培養基。
小白: 那培養基中含有抗生素會對細胞轉染有影響嗎？
小M: 可添加抗生素。但是為了提高轉染效率，建議剛開始轉染前使用無抗生素培養基，后續可根據具體的實驗體系添加相應抗生素。
小白: 那在具體的操作過程中，DNA 和 PolyFast Transfection Reagent 的比例是多少呢？
小M: 我們推薦的 DNA (μg) 和 PolyFast Transfection Reagent (μL) 的用量比例為 1:3。如有必要，可在 1:1-1:5 的范圍內調整以優化轉染效果。最佳轉染條件因不同的細胞類型和培養條件而有所區別，轉染前，可做預實驗摸索最佳轉染比例。
小M: 此外，除了轉染質粒 DNA，我們的轉染試劑也適用于 RNA 轉染~
小白: 那可以同時轉染兩個質粒嗎？
小M: 當然也可以啦！共轉的話，建議總 DNA 及 PolyFast Transfection Reagent 的用量同步提高兩倍，再根據具體的實驗結果摸索兩個質粒的使用比例。
小M: 就是如此優秀，小 M 帶大家一起來看下我們的測試數據吧。
MCE PolyFast Transfection Reagent 對多種常見細胞具有高水平轉染效率，也可轉染一些原代細胞和難轉染細胞。
下表列舉了本產品適用的部分細胞系。
圖 3. 適用細胞系
圖 4. HEK293 細胞中和 BHK-21 細胞中轉染效率比較
圖 5. 轉染效率比較和細胞活力測定
左：293 T 細胞，pcDNA3-C-REP 質粒 (2.5 μg)；PolyFast Transfection Reagent (7.5 μL)；右：Huh-7 細胞活力測定
看了這么多，是不是心動啦？有了 MCE PolyFast Transfection Reagent，老板再也不用擔心我做不好細胞轉染實驗啦！
