為實體瘤患者帶來新希望的TIL療法介紹與國內外TIL療法新布局
1月30日CDE通過了杭州厚無生物醫藥科技有限公司和廣東天科雅生物醫藥科技有限公司提交的"HV-101注射液"獲得臨床試驗默示許可，用于治療晚期復發或者轉移性實體瘤。這是目前國內第四款獲得IND審批的TIL（tumor infiltrating lymphocyte）藥物，在此兩天前廣州智瓴生物醫藥有限公司的ZLT-001注射液剛作為第三款TIL藥物獲得審批。過繼細胞免疫療法對于大眾可能是一個陌生的名詞，但是說到一針天價的抗癌神器CAR-T，相信不少人都會恍然大悟。得益于媒體的宣傳，免疫療法已經進入了大眾的視野，但是過繼細胞免疫療法是一個龐大的家族，前文提到的CAR-T療法目前主要應用于血液腫瘤，對于病人基數更廣泛、治療難度更大的實體瘤來說， TIL療法或許才是最有希望的救星。
TIL療法
人體腫瘤組織內浸潤了大量的T細胞，這些T細胞中存在部分針對腫瘤特異性抗原的T細胞，可以深入腫瘤組織內部殺傷腫瘤，這些細胞被稱為TIL即腫瘤浸潤淋巴細胞。以此為原理科學家們開發了TIL療法用于攻克實體瘤，TIL的產生可分為兩個步驟：快速擴增前程序pre-REP，以及耗時14天的REP過程【1】，將腫瘤組織中的T細胞分離出，在體外進行刺激擴增，這個過程尤為關鍵的地方是為了保證增殖能力，需要使用特定的培養基。早期實驗是添加大量的IL-2進行擴增，但是科學家們發現這樣會導致腫瘤免疫逃逸發生。隨后經過長期探索制定了除使用IL-2外，需添加細胞因子IL-7、IL-12、IL-15以及單克隆抗體CD3、CD134以及PD-1的擴增模式。TIL擴增這一步驟十分關鍵，在很大程度上決定了后續治療的效果以及不良反應的控制。在細胞增殖達到我們需要的數量級時回輸到患者體內，從而擴大免疫應答，治療原發或繼發腫瘤。
Fig1. TIL療法的基本步驟
國際TIL療法最新布局
相比于其他的細胞療法，TIL療法擁有更明顯的優勢。首先TIL療法的免疫細胞來自于腫瘤組織，而其他細胞免疫療法大部分來源取自血液，這直接決定了TIL細胞具有更強的腫瘤識別能力。另一方面，TIL療法由具有多個T細胞抗原受體（TCR）克隆的T細胞組成，能夠識別一系列腫瘤抗原。TIL療法這些優勢解決了實體瘤具有高度異質性腫瘤抗原的難題，彌補了目前免疫治療無法攻克實體瘤的空白。
TIL療法領域的龍頭企業當屬總部位于San Carlos的Iovance，公司從TIL療法奠基人Steve Rosenberg教授手中獲得了包括化合物和生產技術等多項相關專利許可，同時抓住了唯快不破的原則，開發了GMP生產流程，將整個過程縮短至22天，極大的提高了治療效率。公司官網公布了TIL管線研發還涉及TIL聯合用藥方案覆蓋多種癌癥，進一步擴大自身的商業版圖。
Fig2. Iovance官網展示的TIL療法過程以及在研管線
在美國的另一邊，立足于Dallas的Instil Bio公司于2018年成立，研發了使用共刺激抗原受體（Co-Stimulatory Antigen Receptor,CoStAR）研發工程化TIL的技術， CoStAR分子由葉酸受體α（FRα）激活，在腫瘤微環境中提供強大的共刺激信號，可以提升TIL的增殖能力以及在腫瘤微環境中的活性。目前公司的拳頭研發產品ITIL-306的首次人體試驗采用無外源輸注IL-2的臨床方案，希望進一步提高安全性。
Fig3. Instil Bio在研管線
國內TIL療法布局
我國專注于TIL療法的研發企業也在迅速發展，雖然起步較晚，但是我國相關企業在許多技術環節甚至已經達到國際領先水平，華賽伯曼CTO趙毅博士在接受采訪時曾表示：“華賽伯曼利用穿刺方式獲取病人腫瘤組織樣本，僅0.01g即可實現后續至少90%成功率的細胞培養，作為參考TIL領軍者Iovance公司則需要1.5g的樣本。同時華賽伯曼的實驗室且僅需16天就能擴增到治療所需數量級的細胞進行回輸，這無疑是一個巨大的領先優勢。
Fig4. 華賽伯曼在研管線
我國的TIL療法領頭羊沙礫生物已經在研發經過基因修飾的下一代TIL療法，公司擁有三大核心技術平臺：StemTexp®平臺、ImmuT Finder®平臺以及StaViral®平臺。用于治療轉移或復發實體瘤的GT101注射液是國內首個獲批臨床的TIL療法，其中ImmuT Finder®平臺，已建立多個體內及體外腫瘤模型，能更好地模擬TIL在病人體內的真實情況，同時平臺可以對TIL細胞進行全基因組的篩選，可以縮短過程至3個月，相較于目前其他公司選擇的高通量篩選方法，極大的提高了篩選效率。
Fig5. 沙礫生物在研管線
除此之外勁風生物、君賽生物、西比曼生物、卡替醫療也在TIL領域快馬加鞭推進研發進程。在這場群雄逐鹿的混戰中，各家企業都有著自己的秘密武器，勁風生物致力于將生物信息學和人工智能技術融入自身的研發過程，已達到多元視角提高研發生產效率的目的；君賽生物在研的GC101TIL 是全球首個無需清淋、無需IL-2注射的天然TIL細胞治療藥物；西比曼生物的C-TIL051則獲得了FDA批準，C-TIL051使用了公司專有的工藝，在人體內可以更快、更有效地達到臨床劑量；卡替醫療研發的第四代產品——“超強型cTIL”，僅需采集外周血中的TIL細胞，極大地拓展了適用人群。另外資本方面，根據《2022創新藥白皮書》顯示2022年我國TIL融資事件共有3起涉及資金9.17億元【2】。
自1986年Steve Rosenberg教授通過動物實驗證明TIL的治療有效性，到1988年發表的第一個TIL積極臨床試驗結果，短短幾十年的研發進程，TIL憑借自身明顯的優勢，成為最有希望幫助人類攻克實體瘤的秘密武器。我國的TIL研發企業起步較晚，但是各個企業都力爭在各個技術層面尋求突破，建立自身獨特的市場競爭力，靠技術壁壘為自己爭取一席之地。在免疫治療勢不可擋的發展趨勢下，我們有理由相信目前臨床在研的相關藥物會給我們帶來一個又一個驚喜。
TIL所需重要原料
CD3
| 貨號 | 產品名稱 | 規格 |
| GMP-TL101 | 抗人CD3單克隆抗體（人源化） | 500μg |
✦產品性能
Fig1：CD3單抗純度檢測：SDS-PAGE
Fig2：CD3單抗純度檢測：HPLC
Fig3：CD3單抗與Jurkat細胞結合率
Fig4：T細胞增殖
IL-2
| 貨號 | 產品名稱 | 規格 |
| GMP-TL777 | 重組人IL-2蛋白(高效型) | 50μg |
✦產品性能
Fig1：IL-2純度測試數據：SDS-PAGE
Fig2：IL-2活性測試數據
IL-7
| 貨號 | 產品名稱 | 規格 |
| GMP-TL506 | 重組人IL-7蛋白 | 50μg/100μg |
✦產品性能
Fig1：IL-7純度測試數據:SDS-PAGE
Fig2：重組人IL-7蛋白，可刺激PBMC增殖，比活性1×10⁷IU/mg(參考標準NIBSC代碼：90/530)
IL-15
| 貨號 | 產品名稱 | 規格 |
| GMP-TL801 | 重組人IL-15蛋白 （長效型） |
50μg/100μg |
✦產品性能
Fig1：重組人IL-15蛋白（長效型）純度檢測:SDS-PAGE
解讀文獻：
【1】 Zhao Y, Deng J, Rao S, Guo S, Shen J, Du F, Wu X, Chen Y, Li M, Chen M, Li X, Li W, Gu L, Sun Y, Zhang Z, Wen Q, Xiao Z, Li J. Tumor Infiltrating Lymphocyte (TIL) Therapy for Solid Tumor Treatment: Progressions and Challenges. Cancers (Basel). 2022 Aug 27;14(17):4160.
【2】 《2022創新藥白皮書》
