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石蠟制片與冷凍制片的實驗步驟及高效得到高質(zhì)量冰凍切片的方法介紹

瀏覽次數(shù):2482 發(fā)布日期:2023-2-1  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

組織學(xué)設(shè)備是免疫組化實驗的必備設(shè)備,而免疫組化的常用切片主要包括石蠟切片和冰凍切片兩種。

石蠟制片的步驟:

取材→脫水(固定、脫水、透明、浸蠟)→石蠟包埋→切片→染色、封片→鏡下觀察。

這里涉及到的常用基礎(chǔ)組織學(xué)設(shè)備有:脫水機、包埋劑、石蠟切片機、染色機、封片機、顯微鏡等。


冷凍制片的步驟:
取材→冷凍包埋→切片→染色(手動也行)→鏡下觀察。

必須用到的基礎(chǔ)組織學(xué)設(shè)備有:速凍儀、冷凍切片機、顯微鏡。

免疫組化有哪些痛點?免疫組化實驗根據(jù)樣本類型、抗體類型、切片要求等條件的不同,對應(yīng)免疫組化要求也不同。同時石蠟切片在免疫組化實驗中制片步驟繁瑣,組織前處理要求高,可能破壞抗原,需要做抗原修復(fù);而冰凍切片能夠較好地保存組織的抗原免疫活性,做免疫組化時不需抗原修復(fù)這一步。想要避開抗原修復(fù)這一步驟,免疫組化切片時可以選擇冰凍切片。冰凍切片雖然無需抗原修復(fù),但在免疫組化時常常會遇到:

  • 細胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細胞結(jié)構(gòu);
  • 切片厚度也較石蠟的厚,會直接影響切片質(zhì)量;
  • 如果冷凍切片機箱體制冷不足,就需要使用速凍儀輔助冷凍包埋組織。
采用冷凍包埋組織,這對于實驗室來說,也是一筆不小的運維成本。選擇一臺高質(zhì)量的冷凍切片機,不僅可以獲得高質(zhì)量冰凍切片,還可省去速凍儀輔助冷凍包埋組織這一步驟,也能滿足新技術(shù)人員的切片需求來保證實驗的正常開展等。
 
如何高效得到高質(zhì)量冰凍切片?

瑞沃德冷凍切片機用于免疫組化實驗冷凍切片時,可解決以上所有難題 :

1、緩解片子偏厚問題
 

▲圖:瑞沃德冰凍切片機切片實拍圖
 

  • 壓縮機冷量輸出大可做二次溫控補償;PID控溫,使得箱體溫度在一定范圍內(nèi)波動且可以自動恢復(fù);
  • 頂/級十字交叉導(dǎo)軌搭配五相高分辨率步進電機、精密絲桿和水平進樣滑塊,組成高精準進樣系統(tǒng);
  • 以上兩點保證切片無需設(shè)置過厚就能切出滿足需求的片子。


2、緩解冰晶產(chǎn)生的壓力

▲瑞沃德冰凍切片機可開啟快冷功能


冰晶主要產(chǎn)生于樣本冷凍包埋階段,因為冷凍過程緩慢從而產(chǎn)生冰晶,這就要求設(shè)備的冷凍效果要滿足樣本速凍需求。瑞沃德冷凍切片機速凍臺最低溫度可達-42℃,快速制冷點溫度最低可達-60℃,滿足速凍需求,同時箱體和樣本頭均可單獨制冷,從而減少冰晶產(chǎn)生,保證切片質(zhì)量。


3、運維成本低

圖片


瑞沃德冷凍切片機具備2個半導(dǎo)體快速制冷點和15個常規(guī)制冷點,滿足任務(wù)量大的應(yīng)用場景,同時速凍臺制冷效果達到行業(yè)國際標準,達到速凍包埋效果,無需使用速凍儀包埋。冷凍包埋成本更低。同時具備操作日志記錄,可及時有效開展切片工作復(fù)盤,優(yōu)化切片條件,提高切片質(zhì)量。
 
4、自動切片考慮到一些新技術(shù)老師開展免疫組化實驗,對冷凍切片機不熟悉,無法掌握切片條件導(dǎo)致出現(xiàn)切片質(zhì)量問題。瑞沃德冷凍切片機具備自動切片功能,設(shè)置好切片條件,開啟自動切片,保證切片質(zhì)量高且穩(wěn)定同時,更加貼合新人的實驗場景,保證實驗高效開展
發(fā)布者:深圳市瑞沃德生命科技股份有限公司
聯(lián)系電話:400-966-9516
E-mail:rwd@rwdls.com

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