細 胞 基本信息
 

細胞名稱：293 人胚腎細胞

細胞別稱：Hek293; HEK-293; HEK/293; HEK 293; HEK;293; 293; 293 HEK; 293 Ad5; Graham 293; Graham-293; Human Embryonic Kidney 293
 

細胞類型：上皮細胞

細胞簡介：293 [HEK-293]細胞人類胚胎的腎臟中分離的表現出上皮形態的細胞，后經剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉染的人胚腎細胞形成的永生化細胞，293 [HEK-293]細胞包含并表達轉染的Ad5基因。早期報道中指出，293 [HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA，但是現在明確了只存在其左側端的DNA。經過對Ad5的插入點測序發現，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主，可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。293細胞表達玻連蛋白。293細胞可用于工業生物技術和毒理學研究，功效測試和病毒測試中也有應用。
 

293細胞正常生長形態照片

操 作 實 例

293細胞收貨后細胞都是圓形聚集的，有的沒有貼壁，細胞是不是死了？
 

小尚回答：
 

照片上看細胞活性是沒有問題的。由于293細胞對溫度敏感，且貼壁弱，T25發貨運輸過程可能會有部分細胞邊緣漂浮是正常現象，并不是細胞死亡或者狀態不佳。

1.反饋圖片上看大部分細胞都貼壁了，漂浮細胞不多的話可以按照正常操作消化重新接種。該細胞消化時間較短，注意控制消化時間不能過長，消化時間通常會在1min內。

2.若T25瓶內漂浮的細胞團塊較多，可以按照下述步驟離心收集，再進行消化處理。

①收集所有培養基及漂浮細胞到無菌50ml離心管，1000rpm，5min離心收集細胞沉淀。

②取培養基上清到4℃保存，用于培養細胞，以平穩過度到客戶自己的培養基。在原50ml離心管中加入5mlPBS重懸細胞沉淀，盡量吹散后1000rpm，5min離心，棄上清。

③加入1ml胰酶輕輕震蕩混勻，勿直接吹打細胞。然后放入培養箱消化1min左右，消化完成后用移液器輕輕吹打幾下，吹散細胞后立刻加5ml完培終止消化。1000rpm，5min離心，棄上清。

④加入1ml完培重懸細胞接種到新培養瓶中。T25加10-12ml培養基培養，通常2-3天左右換液一次，若培養基變黃及時換液，以維持一個相對穩定的培養條件，有利于細胞活正常生長。

⑤原T25剩余貼壁細胞密度大于70%，可以正常消化傳代；貼壁細胞較少可以加培養基正常培養至70%密度以上消化傳代；若幾乎沒有細胞則可以丟棄。

⑥若出現傳代后次日貼壁較少的情況，可以收集培養基及漂浮細胞到離心管，離心收集未貼壁細胞，然后加新培養基盡量重懸吹散后接種回原培養瓶讓細胞繼續貼壁，注意小心操作，避免將已貼壁細胞吹下。
 

注意事項

1.由于293系列細胞（包括293、293T、293F等幾乎所有衍生系）均貼壁較弱，且對溫度非常敏感，低溫時經常出現細胞變圓甚至脫落的現象，因此細胞觀察時應注意不要室溫放置太長時間、不要使用過低溫度的培養基、胰酶、PBS等試劑處理細胞。

2.運輸后出現細胞變圓脫落情況時，脫落現象不嚴重僅是變圓時可以平衡細胞2h以上再按正常步驟消化細胞即可，若脫落較嚴重甚至大量聚團漂浮時建議直接收集細胞離心后消化再重新接種。

3.由于293細胞本身貼壁較弱細胞消化時間本身較短，必須控制消化時間和吹打力度，避免細胞消化或吹打死亡過多導致無法正常貼壁生長。消化時間過長、吹打力度過大等均可能導致細胞傳代死亡或者不長，尤其是脫落后的細胞會更敏感，切記注意操作細節。
 

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公 司 簡 介

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