經歷過酷暑，大部分城市的氣溫開始有所下降，外出體感溫度有所緩和，在兩季交接之際，人們很容易感冒發燒，機體為何會發燒呢？

在免疫系統應對感染、損傷或組織破壞等的即時反應病理過程中，機體內環境中多種物質水平升高，這些物質在體內通過一系列復雜的信號通路，將信號傳至大腦體溫調節中樞，最終引起體溫異常上升，即表現發燒癥狀。因此發燒是疾病的一個非常重要的指標^[3]。


                                                              熱原誘導發熱的機制圖

能引起恒溫動物體溫異常升高的物質稱為熱原，內毒素是最常見的外源性熱原。

一、什么是內毒素？

它是革蘭陰性菌細胞壁的特殊組分：脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），于細菌死亡解體后大量釋放，當全身存在足夠數量時，可引起發熱、微循環障礙、內毒素休克及彌漫性血管內凝血，多器官衰竭，有時甚至導致人類死亡^[4]。

                                                       LPS引起發熱機制圖
 

在科研實驗中，內毒素也是個不可忽視的因素。

內毒素對不同的細胞會造成不同的影響，主要表現為如下兩方面：(1)改變細胞外形，如造成肝細胞外形改變并使變形后的肝細胞吸收六碳糖的能力降低；(2)內毒素在細胞增殖培養過程中引起促進或抑制細胞增殖現象^[2]。

二、耐思產品如何助陣？

國家強制性要求用于人類衛生健康領域的生物醫藥、醫療器械產品需要檢查熱原和內毒素含量。

目前列入中國藥典的熱原檢查方法為兔熱原檢測(RT)法，細菌內毒素檢查方法為鱟試驗(LT)法（進一步分為兩種：凝膠法、光度測定法）。其他檢測方法的研究和建立也越來越多，比如酶聯免疫吸附測定（ELISA）法、單核細胞活化試驗檢測法等。


耐思細胞培養和生物工藝解決類產品在萬級和十萬級潔凈車間生產包裝，納入了內毒素檢測指標。產品電子束滅菌后對產品進行內毒素鱟試驗法檢測，嚴格控制產品內毒素指標，確保產品完美適用于細胞培養。

除內毒素對科研實驗中細胞培養有不利影響外，核酸酶也是個不定時炸彈。

一、什么是核酸酶？

核酸酶是所有可以水解破壞核酸的酶類，廣泛存在于動植物體內。根據作用底物不同可以將其分為DNA酶（DNase）和RNA酶（RNase）兩類。

二、對機體細胞的不利影響

核酸酶在體內一般情況下發揮著重要的生理功能。當體內、外環境存在各種不利因素的影響時，細胞內DNA雙鏈骨架結構不穩定，連接的磷酸二酯鍵被核酸酶水解，會導致DNA鏈發生斷裂損傷。DNA斷裂可阻止RNA合成過程中鏈延伸或者引起染色質結構變化，可造成轉錄異常；RNase 對mRNA的異常降解，影響蛋白質表達水平。

這些都會導致表達產物量和質的變化，對細胞功能造成不同程度的影響，甚至導致細胞死亡。

有研究表面，DNase1可加重對乙酰氨基酚引起的小鼠肝細胞壞死^[5]。還有研究表明，DNase介導半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶依賴性細胞凋亡期間的染色質塌陷，參與凋亡核形態的形成^[6]。


三、耐思產品如何助陣？

耐思產品在萬級和十萬級潔凈車間生產包裝，納入核酸酶檢測指標，產品進行qPCR試驗驗證產品無核酸酶狀態，確保產品無核酸酶。

無核酸酶的耐思細胞培養類、生物工藝解決類耗材，可減少細胞培養環境中的有害因素和受損風險，有利于維持其正常的生物學特性和功能，從而有利于細胞實驗研究或活性蛋白的生產。同時也減少實驗的干擾因素，確保研究結果的準確性。


                                    耐思細胞學類和生物工藝解決類耗材

核酸分子檢測類產品，應用目的為樣品中核酸的定性和定量檢測，檢測過程和環境中不得含有破壞核酸的物質。耐思PCR類耗材無核酸酶污染，確保其核酸檢測結果的準確可靠。

                                                      耐思PCR耗材

如果您有購買意向，歡迎致電我們的代理商或銷售人員！

聯系我們

TEL：0510-6800 6788

E-mail：info@nest-wuxi.com

網址：www.cell-nest.com

 

參考資料：

[1] 步宏，李一雷.病理學[M] .9版.北京：人民衛生出版社，2018

[2] 孫巍群，陳錦陽，劉軍權. 臨床用細胞培養實驗室質量控制[J]. 中華臨床實驗室管理電子雜志. 2019 年 8 月 第 7 卷 第 3 期

[3] N Prajitha, S Athira, P Mohanan. Pyrogens, a polypeptide produces fever by metabolic changes in hypothalamus: Mechanisms and detections[J]. Immunology Letters, Volume 204, December 2018, Pages 38-46.

[4] P.E. Boucher. Chapter 22 - A Framework for Evaluating Nonclinical Safety of Novel Adjuvants and Adjuvanted Preventive Vaccines. Immunopotentiators in Modern Vaccines (Second Edition), 2017, Pages 445-476.

[5] Markus Napirei, Alexei G. Basnakian, Eugene O. Apostolov, Hans Georg Mannherz. Deoxyribonuclease 1 aggravates acetaminophen‐induced liver necrosis in male CD‐1 mice[J]. Liver Biology and Pathobiology, First published: 26 January 2006.

[6] Victoria Iglesias-Guimarais, Estel Gil-Guiñon, María Sánchez-Osuna, Mercè García-Belinchón, Joan X. Comella, Victor J. Yuste. Chromatin Collapse during Caspase-dependent Apoptotic Cell Death Requires DNA Fragmentation Factor, 40-kDa Subunit-/Caspase-activated Deoxyribonuclease-mediated 3′-OH Single-strand DNA Breaks[J]. CELL BIOLOGY, Volume 288, Issue 13, P9200-9215, March 2013.