細胞外泌體標志物作為生物試劑在蛋白診斷中的應用
外泌體是由正常或病理條件下的細胞所分泌，含有各種膜蛋白和胞質蛋白等蛋白質和核酸。因此，外泌體標志物也可以作為生物試劑潛在地用于蛋白診斷。外泌體中發現的十種蛋白質主要包括熱休克蛋白 8 (HSPA8)、CD63 抗原 (CD63)、β 肌動蛋白 (ACTB)、甘油醛-3-磷酸脫氫酶 (GAPDH)、烯醇化酶 1 α (ENO1)、細胞溶質熱休克蛋白 90 α (HSP90AA1)、CD9、CD81、酪氨酸 3-單加氧酶/色氨酸 5-單加氧酶激活蛋白、zeta 多肽 (YWHAZ)、肌肉丙酮酸激酶 (PKM2) 。
外泌體標志物蛋白
外泌體蛋白屬于各種功能組，例如四跨膜蛋白（CD9、CD63 和 CD81）、熱休克蛋白（HSC70 和 HSC90）、膜轉運蛋白（GTPases）和脂質結合蛋白。
生物試劑 Tetraspanins 是常見的外泌體標志物。它們包括 CD9、CD63 和 CD81 膜蛋白。Tetraspanins 參與外泌體的產生。在抗原呈遞細胞中，MHC-II 分子的功能通過它們整合到富含四跨膜蛋白 CD9 的細胞質膜區域中來調節。
CD63外泌體蛋白被認為是癌癥的蛋白質標志物。此外，四跨膜蛋白家族的另一成員CD81在丙型肝炎的細胞進入中起重要作用。慢型丙型肝炎患者血清中的外泌體 CD81 會升高，表明 CD81 可能是丙型肝炎感染的標志物。
膠質母細胞瘤表皮生長因子受體 vIII (EGFRvIII) 被認為是膠質母細胞瘤的標志物。關于中樞神經系統，在腦腫瘤者血清中分離的外泌體中也檢測到了 EGFR、EGFRvIII 和 TGFβ。
此外，外泌體還參與神經退行型癥。在神經退行型癥個體的腦脊液和外周血中已檢測到幾種特定于阿爾茨海默氏癥、帕金森氏癥和Creutzfeldt-Jakob 的聚集蛋白。特別是，在從阿爾茨海默者的腦脊液樣本中獲得的外泌體中檢測到 Thr-181 磷酸化的 tau。在 Thr-181 磷酸化的 Tau 是阿爾茨海默的既定生物標志物。此外， α-突觸核蛋白也常在阿爾茨海默者的群體中檢出。
此外，在尿液中發現的外泌體標志物也可以是膀胱和前列腺腫瘤的標志物。比如：視黃酸誘導蛋白 3 (GPRC5A) 、抵抗素、外泌體蛋白PCA-3 、 TMPRSS2:ERG、 α1-抗胰蛋白酶、組蛋白 H2B1等。
除了腦和泌尿道腫瘤外，外泌體蛋白也可以是胰腺癌的標志物。比如：結直腸癌的外泌體蛋白標志物包括 EpCAM、cadherin-17、粘蛋白 13 (MUC-13)、角蛋白 18、claudins 和 ephrin B1。
外泌體核酸
通過對外泌體以及外泌體提取相關生物試劑的研究發現：外泌體除了蛋白質，外泌體還含有 RNA。外泌體 miRNA 可用于各種腫瘤的判斷（圖 3）。目前有八種 miRNA 被確定為卵巢癌的標志物。此外，據報道，肺腺癌者的血清和腫瘤樣本中的 miRNA 會增加。前列腺癌的血清中外泌體 miRNA miR-141 和 miR-375 水平會升高。研究表明，外泌體 miRNA-21 的血清水平升高和 miRNA-1246 在 ESCC 群體中凸現。有趣的是，外泌體 miRNA 可能是腎纖維化和心血管癥的潛在判斷標志物。對于進行型退行型疾病，在阿爾茨海默者的生物體液中發現了幾種 miRNA，如： miR-9、miR-107、miRNA-128、miRNA134 和 miRNA-137 miRNA124 的高表達水平。
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來源：蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
外泌體標志物蛋白
外泌體蛋白屬于各種功能組，例如四跨膜蛋白（CD9、CD63 和 CD81）、熱休克蛋白（HSC70 和 HSC90）、膜轉運蛋白（GTPases）和脂質結合蛋白。
| 蛋白質 | 編號 | 主要蛋白型號 |
| 亞當10 | 26 | Abcam ab124695 , R&D Systems MAB1427 , Santa Cruz Biotechnology sc-48400 |
| ATF3 | 21 | Santa Cruz Biotechnology sc-188 , Abcam ab207434 |
| 小窩蛋白-1 | 142 | Cell Signaling Technology 3267 、BD Biosciences 610406 、Novus Biologicals NB100-615 |
| CD10 | 273 | Invitrogen MA5-14050 , Leica Biosystems PA0271 , BD Biosciences 555373 |
| CD24 | 260 | Invitrogen MA5-11828 、BD Biosciences 555428 、 BioLegend 311101 |
| CD26 / DPP4 | 39 | BioLegend 302702 , BD Biosciences 555435, Invitrogen MA1-35147 |
| CD29 / ITGB1 | 502 | BD Biosciences 610467 , EMD Millipore MAB2079Z , Abcam ab52971 |
| CD49d | 110 | BD 生物科學 555502, BioLegend 304302, Invitrogen 12-0499-42 |
| CD63 | 214 | BD Biosciences 556019 、Santa Cruz Biotechnology sc-5275、 Abcam ab8219 |
| CD69 | 497 | BioLegend 310902 , BD Biosciences 560740 , Invitrogen MA1-207 |
| CD81 | 114 | BD Biosciences 555675 , Santa Cruz Biotechnology sc-166029 , Abcam ab79559 |
| CD9 | 177 | Abcam ab92726, BD Biosciences 555370, Invitrogen AHS0902。 |
| 克勞丁 | 138 | Invitrogen 37-4900、Santa Cruz Biotechnology sc-81796 、Abcam ab180158 |
| 表皮生長因子八 | 924 | Cell Signaling Technology 4267 、Invitrogen MA1-12693 、Abcam ab52894 |
| 恩姆普林 / CD147 | 59 | Santa Cruz Biotechnology sc-71038, BD Biosciences 555962, BioLegend 306209 |
| 胎球蛋白A | 3 | 圣克魯斯 sc-137102 , 義翹神州 10318 -R001 |
| GPC1 | 6 | 圣克魯斯 sc-365000, EMD Millipore MAB2600 |
| GPRC5A | 1 | 細胞信號技術 12968 |
| HSC70 / HSPA8 | 209 | Santa Cruz Biotechnology sc-7298、Enzo Life Sciences ADI-SPA-815-D 、Abcam ab19136 |
| 熱休克蛋白70 | 29 | BD Biosciences 610607、multimmune GmbH cmHsp70.1 、EMD Millipore MAB3516 |
| 熱休克蛋白90 | 416 | Santa Cruz Biotechnology sc-13119 、Cell Signaling Technology 4877 、BD Biosciences 610418 |
| HSP90AB1 | 111 | Santa Cruz Biotechnology sc-13119 、Invitrogen 37-9400、 Abcam ab32568 |
| L1CAM | 59 | Invitrogen MA5-14140 、Abcam ab24345、 MilliporeSigma L4543 |
| MSN/莫辛 | 27 | Abcam ab52490 , BD Biosciences 610401, Santa Cruz Biotechnology sc-13122 |
| NKCC2 | 6 | 發育研究瘤庫 T4 , Abcam ab171747 |
| PDCD6IP / Alix | 54 | Cell Signaling Technology 2171、Santa Cruz Biotechnology sc-53540、Abcam ab117600 |
| PSA | 31 | Santa Cruz Biotechnology sc-7316、 Cell Signaling Technology 5365、Dako M0750 |
| RAP1B | 1 | 細胞信號技術 2326 |
| 抵抗素 | 2 | 研發系統 MAB13591 |
| 生存素 | 176 | Cell Signaling Technology 2808 、Santa Cruz Biotechnology sc-17779 、Novus Biologicals NB500-238 |
| TSG101 | 89 | Santa Cruz Biotechnology sc-7964 、Abcam ab83 (20)、GeneTex GTX70255 |
| TYRP-2 | 5 | 圣克魯斯 sc-74439 |
表 2。外泌體標記物及其在免疫組織化學、免疫細胞化學、流式細胞術和 ELISA 等抗體應用中的常用的單克隆抗體。
生物試劑 Tetraspanins 是常見的外泌體標志物。它們包括 CD9、CD63 和 CD81 膜蛋白。Tetraspanins 參與外泌體的產生。在抗原呈遞細胞中，MHC-II 分子的功能通過它們整合到富含四跨膜蛋白 CD9 的細胞質膜區域中來調節。
CD63外泌體蛋白被認為是癌癥的蛋白質標志物。此外，四跨膜蛋白家族的另一成員CD81在丙型肝炎的細胞進入中起重要作用。慢型丙型肝炎患者血清中的外泌體 CD81 會升高，表明 CD81 可能是丙型肝炎感染的標志物。
膠質母細胞瘤表皮生長因子受體 vIII (EGFRvIII) 被認為是膠質母細胞瘤的標志物。關于中樞神經系統，在腦腫瘤者血清中分離的外泌體中也檢測到了 EGFR、EGFRvIII 和 TGFβ。
此外，外泌體還參與神經退行型癥。在神經退行型癥個體的腦脊液和外周血中已檢測到幾種特定于阿爾茨海默氏癥、帕金森氏癥和Creutzfeldt-Jakob 的聚集蛋白。特別是，在從阿爾茨海默者的腦脊液樣本中獲得的外泌體中檢測到 Thr-181 磷酸化的 tau。在 Thr-181 磷酸化的 Tau 是阿爾茨海默的既定生物標志物。此外， α-突觸核蛋白也常在阿爾茨海默者的群體中檢出。
此外，在尿液中發現的外泌體標志物也可以是膀胱和前列腺腫瘤的標志物。比如：視黃酸誘導蛋白 3 (GPRC5A) 、抵抗素、外泌體蛋白PCA-3 、 TMPRSS2:ERG、 α1-抗胰蛋白酶、組蛋白 H2B1等。
除了腦和泌尿道腫瘤外，外泌體蛋白也可以是胰腺癌的標志物。比如：結直腸癌的外泌體蛋白標志物包括 EpCAM、cadherin-17、粘蛋白 13 (MUC-13)、角蛋白 18、claudins 和 ephrin B1。
外泌體核酸
通過對外泌體以及外泌體提取相關生物試劑的研究發現：外泌體除了蛋白質，外泌體還含有 RNA。外泌體 miRNA 可用于各種腫瘤的判斷（圖 3）。目前有八種 miRNA 被確定為卵巢癌的標志物。此外，據報道，肺腺癌者的血清和腫瘤樣本中的 miRNA 會增加。前列腺癌的血清中外泌體 miRNA miR-141 和 miR-375 水平會升高。研究表明，外泌體 miRNA-21 的血清水平升高和 miRNA-1246 在 ESCC 群體中凸現。有趣的是，外泌體 miRNA 可能是腎纖維化和心血管癥的潛在判斷標志物。對于進行型退行型疾病，在阿爾茨海默者的生物體液中發現了幾種 miRNA，如： miR-9、miR-107、miRNA-128、miRNA134 和 miRNA-137 miRNA124 的高表達水平。
| 外泌體 miRNA | 判斷與應用 |
| miR-21、-141、-200a、-200b、-200c、-203、-205、-214 | 卵巢癌 |
| miR-17、-3p、-21、-20b、-223、-301、let-7f | 肺癌 |
| miR-141、miR-375 | 前列腺癌 |
| miR-21、miR-1246 | 食管鱗狀細胞癌 |
| C21 | 乳腺癌 |
| Let-7 家族 miRNA | 胃癌 |
表 3。外泌體 miRNA 標記。
蘇州阿爾法生物13年專注于生物實驗室儀器和生物試劑、實驗室耗材的專業供應商。阿爾法試劑主要包括質粒提取試劑盒、PCR試劑、一抗、雙抗、二抗、抗體蛋白、單克隆抗體、基因組提取試劑盒、RNA提取試劑盒、Qpcr試劑、培養基、胎牛血清等。
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