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小麥粉中嘔吐毒素檢測的高通量固相萃取方法

瀏覽次數:2223 發(fā)布日期:2022-8-22  來源:逗點生物官方微信公眾號

嘔吐毒素,也叫做脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON) ,是一種單端孢霉烯族化合物,由于該毒素能夠引起動物嘔吐等中毒癥狀, 故而稱為嘔吐毒素。小麥作為主食作物,是嘔吐毒素分布最廣的作物之一。

在小麥生產加工的過程中, 嘔吐毒素伴隨著面粉的制成存在于小麥粉中,嚴重危及人們的身體健康。因此,精準快速地檢測糧食作物及其制成品中嘔吐毒素含量,對于保證食品安全具有重要的意義。
 

圖片來源:攝圖網

 

逗點生物采用自主研發(fā)的24孔Copure® 230多功能凈化板,實現了嘔吐毒素的快速、高通量檢測。

建立小麥粉中嘔吐毒素檢測的LC檢測方法,LC方法中兩個水平(200 ng/g,400 ng/g)的加標回收率均在90-110 %之間,孔間回收率CV值小于5 %。本方法操作簡便快捷,具有回收率高和除雜效果好的優(yōu)勢,能夠作為小麥粉中嘔吐毒素檢測的參考方法。

參照《GB 5009.111-2016 食品安全國家標準 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的測定 》
 

一、樣品前處理

1.1  樣品提取

1)稱取2 g樣品,加入20 mL乙腈-水溶液(9+1)混合均勻。

2)渦旋15 min后,6000 r/min離心5 min,取上清液,待凈化用。

 

1.2  樣品凈化
 

Copure® 230多功能凈化板(貨號:COAF230-GTL)

 

1)將24孔凈化板放置在24孔收集板上,再向凈化板孔中加入6 mL樣品提取液。

2)將24孔凈化板和收集板放置在24孔正壓提取裝置下,開啟氣閥開關,使凈化板孔和輸氣孔保持對應,匹配良好。

3)調整氣體輸出壓力,使樣品提取液過濾至收集板中。

4)取4 mL樣品凈化液,40℃下氮氣吹干,用1 mL初始流動相復溶,渦旋30s溶解殘渣,過0.22 μm微孔濾膜,上機分析。

二、儀器條件

儀器設備UltiMate 3000,配DAD檢測器

(Thermo Fisher Scientific)

色譜柱:Agilent ZORBAX  C18 

(4.6 mm×250 mm,5 μm)

流動相: A:甲醇    B:去離子水  

流動相梯度:見表1

流速:0.8 mL/min

柱溫:35℃

進樣體積:50.0 mL

檢測波長:218 nm


表1  流動相洗脫程序
 

三、實驗結果

圖1 使用多功能凈化板處理前后的色譜圖

①小麥粉樣品-未凈化處理   ②Copure® 230多功能凈化板-凈化處理 
 

從圖1中可知,經過Copure® 230多功能凈化板凈化處理后,上機液中雜質被明顯吸附,色譜圖中雜峰更少,目標峰旁邊無干擾峰,定量更準確;24個孔中嘔吐毒素的回收率均在90-110%之間,孔間回收率CV值小于5 %,能滿足實驗使用需求。

表2  LC方法加標回收實驗結果


圖2 使用Copure® 230多功能凈化板凈化后的加標樣品色譜圖(200 ng/g)
 



四、訂購信息

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