牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含607個氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。
一、牛血清白蛋白的作用:
牛血清白蛋白一般做為穩定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中,因為有些酶在低濃度下不穩定或活性低。加入牛血清白蛋白后,它可能起到“保護"或“載體"作用,不少酶類添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。對多數底物牛血清白蛋白而言,牛血清白蛋白可以使酶切更完全,并可實現重復切割。在37℃,酶切反應超過1h時,牛血清白蛋白可以使酶更加穩定,因為在不含牛血清白蛋白的反應緩沖液中,許多限制性內切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內切酶活性的金屬離子和其它化學物質。
二、牛血清白蛋白的成分:
1、蛋白質:是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。纖維粘連素細胞促進細胞附著;α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用;胎牛血清中含胎球蛋白促細胞附著;轉鐵蛋白能結合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用。
2、多肽:血小板促生長因子能促細胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,是主要的促細胞增殖因子;成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經細胞生長因子等,血清中含量雖很少,但對細胞生長也有一定作用。
3、激素:胰島素:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關。類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結合,從而有胰島素同樣的作用。促生長激素:促細胞增殖效應。
4、其他成份:氨基酸、葡萄糖、酮酸等對多種營養成分的合成培養基意義不大。與蛋白相結合狀態的微量元素對細胞培養有意義。
三、關于牛血清白蛋白的常見問題:
1、標準牛血清白蛋白在應用時濃度要適宜,不可太高。牛血清白蛋白組分V現配現用,已經配好的溶液即使是-20度保存一段時間后也會造成你的結果偏高.
2、牛血清白蛋白由熱容易凝固,當加熱到50°C或以上時,白蛋白相當迅速形成疏水性聚集體,不恢復到冷卻后的單體,在某種程度上低溫聚合預計也將會發生的,但是在相對較低的利率。
3、天然牛血清白蛋白(BSA)的等電點為4.6~5.8,經無水乙二an(EDA)和碳化二亞胺(EDC)反應,改性后的牛血清白蛋白等電點為8.6。