連續稀釋是藥物發現中劑量反應曲線的重要組成部分。連續稀釋在檢測限測試、qPCR分析的標準曲線以及各種分析和儀器的校準曲線中也發揮著重要作用。連續稀釋的準確度是對結果有顯著影響的一個重要因素。使用電動移液器進行連續稀釋可提高樣品濃度的準確度，并減少連續稀釋中最高稀釋度下的誤差傳播。

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《使用電動移液器改善連續稀釋的準確度》應用說明通過研究證明了電動移液器是在制備連續稀釋液中的更優選擇。此外，電動移液器具備改進的人體工程學設計，能對樣品進行電動混合，并具有對移液方案進行預編程的能力，這些功能為其在連續稀釋液制備中的應用帶來了更多的優勢。
引言

連續稀釋在藥物發現中扮演著重要的角色。在生物制藥行業，質量控制實驗室越來越多地將用到連續稀釋的質量控制工藝合并，其中包括使用吸光度法或熒光染料來間接推斷稀釋性能、準確度和精確度。

制備連續稀釋液的主要挑戰是準確度和時間。移液過程中誤差的傳遞會影響連續稀釋的準確性。

本應用說明的目的是測試使用電動移液器進行準確連續稀釋的可靠性。我們使用電動移液器和領先的手動移液器制備連續稀釋液，并進行對比。

在本應用說明中，我們對連續稀釋液進行了以下測試：

●移液器類型
●稀釋液濃度的準確度
●稀釋液濃度的精確度（重現性）

方法

移液器和移液器吸頭
使用賽多利斯Picus® 電動移液器、賽多利斯Safetyspace低吸附吸頭和優質的手動移液器制備連續稀釋液。

連續稀釋
對稀釋DNA進行直接吸光度檢測，用于對連續稀釋的準確度進行定量。采用無核酸酶水制備沙門氏菌DNA。使用手動或電動移液器制備了沙門氏菌DNA的七點二倍連續稀釋液。

數據分析
分析數據的線性度、準確度和重現性。通過將濃度測量值與相應稀釋因子的倒數作圖并確定R2值，來確定稀釋系列的線性度。稀釋系列的準確度（濃度測量值與預期濃度的接近程度）由百分比誤差（不準確度%）表示。將濃度測量值減去預期濃度，再除以濃度測量值，然后轉換為百分比，即可得到準確度（不準確度%）。稀釋系列的精確度（重現性）用變異系數（CV%）表示，計算方法為用三次重復測試的標準偏差除以平均濃度，然后轉換為百分比。

結果
使用電動移液器或手動移液器制備的連續稀釋液生成的線性圖表明，兩種手持式移液器制備的稀釋系列都具有線性，兩者的R2值均為0.9999（圖1）。
  圖1：連續稀釋液的線性。（A）Picus® 電動移液器（B）優質手動移液器

準確度
為了評估稀釋系列的準確度，將每個稀釋步驟的測量濃度與預期濃度進行對比。用電動移液器操作的預期濃度和實際濃度之間的差異始終小于 5 %。對于稀釋系列中的最高稀釋度，與使用手動移液器獲得的結果相比，使用電動移液器提高了最高稀釋度樣品的準確度（圖2）。 圖2.優質手動移液器與電動移液器的連續稀釋準確度對比

重現性
重現性（或移液精確性）對連續稀釋來說非常重要。對于使用Picus® 電動移液器制備的三次連續稀釋液，其連續稀釋濃度的百分比變異系數（CV%）很低，遠低于 5 %（表1）。