尾閃試驗( tail-flick test)也叫鼠尾光照測痛實驗，是一種用熱作刺激的急性傷害性知覺疼痛的實驗，即用熱刺激動物（鼠類）的尾巴，當其尾部受到傷害性刺激時會產生明顯的躲避反應，這是一種脊髓的屈曲反射。該疼痛模型最早由D'Amour和Smith在1941年描述，它可測試輕度麻醉的動物而且不受動物運動協調性的影響，因而比熱板試驗具有一定的優越性，但是尾閃試驗的尾巴溫度可能會影響實驗結果，容易造成假陽性或假陰性，試驗最終的行為反應也較為復雜（如舔其后爪）。Janssen等(1963)根據尾閃試驗用溫水(49度)替代熱光源來刺激動物的尾巴測試其反應時間，更新的實驗裝置則可用較局限的熱點刺激，專門刺激菜一個單一的腳爪，然后測定其反應潛伏期，這比熱板試驗刺激的4個全部的腳爪或尾閃試驗刺激的尾部更為精細。

（一）實驗材料

1．實驗動物健康成年雄性小鼠(30 - 35g)或大鼠(200 - 250g)，分組飼養。

2．實驗藥物生理鹽水（對照）與鎮痛藥物（如嗎啡，l0mg/kg，皮下注射）。

3．帶27((大鼠)或30G（小鼠）針頭的1.0ml注射器。

4．帶自動計時器或秒表的尾閃試驗裝置。

5．限制大鼠或小鼠活動的包括毛巾或塑料小筒。

（二）實驗步驟

1、從動物房取出實驗動物，稱重后，讓動物在實驗室適應30min，將對照組與實驗組分開；

2、藥物準備對照組（生理鹽水等）及給藥組（如嗎啡等，計算藥物濃度，如大鼠按2mg，kg紿藥，小鼠按10mg/kg給藥）；

3、測定動物的基礎反應潛伏期( baseline latencies) 用尾閃試驗測試儀（即在一小孔的平板下有一個發熱光源，將大鼠（尾尖部前50mm左右）或小鼠(尾尖部前約15mm)的尾部放在小孔的上方，啟動發熱光源開始計時，直到尾巴躲避為止，調整光源的強度，設大多數鼠的尾部躲閃時間在3- 4s，如果沒有躲避反射則把試驗終止時間設定為10s，以免燒傷；

4、藥物注射將不同的藥物包括對照溶液，隨機順序注射到實驗動物體內。注意計算好給藥時間與試驗測試的時間間隔，試驗持續時間，同時給出足夠的機動時間（如實驗記錄，藥物更換等），必要時讓另外的人注射對照劑或實驗藥品（盲法試驗）；

5、在給藥后15，30及60min時，即測試尾閃反應，將動物放到尾閃測試板并把其尾部放到光源小孔上，即開始計時，觀察動物尾部躲避反應的時間，或直到終止(cut-off)時間。注意一次試驗只測1個時間點，而不是3個時間點；

6、將動物放到尾閃測試儀上到反應出現時的潛伏期或終止實驗時間記錄下來，在所有實驗動物完成測試后（一般每組至少8個數據），分組將其平均并作統計學評估。

尾閃試驗時，也常用到一種稱為最大可能效應百分比（percent max．mum possible effect，MPE，%），即：MPE(%)=[（給藥后一基礎反應），（終止時間一基礎反應）] x 100這里基礎反應與給藥后均指反應潛伏期，所有動物在測試前，應該先測定一下它的反應潛伏期（基礎反應反應潛伏期）；給藥后反應潛伏期是指動物接受藥物（包括對照用生理鹽水或其他載體）注射（或灌注）后實驗中的反應潛伏期；終止時間是指給藥后動物不能對熱作出反應而終止試驗的時間(10s)。

（三）注意事項

1、如果給藥前或對照組動物測不到反應或反應潛伏期很靠近試驗終止時間，說明刺激強度太弱（光源溫度設定較低），必須加大刺激強度。

2、必須保持所有的實驗程痔一致，盡量輕巧抓取動物，讓動物有足夠的時間適應實驗者的氣味及實驗室環境，否則可造成實驗結果的明顯波動或不能重復。

3、刺激光源的強弱，即刺激的強度太高或太弱均可使試驗結果變化較大，而且高強度的刺激可能掩蓋實驗藥物的效果，因此，用藥前的基礎測試非常重要。

4、為了減少實驗的誤差，一般適量限制動物的活動，如用毛巾裹住動物或把它們放入小筒中，這兩種方法掌握不當都可造成動物的壓抑( stress)行為而影響實驗結果。
 

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