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研究級顯微鏡選型中的核心因素

瀏覽次數(shù):1119 發(fā)布日期:2022-3-30  來源:明美

光學顯微鏡是生命科學研究實驗室的核心設(shè)備之一,它被應(yīng)用于不同領(lǐng)域,揭示不同科學問題。本文結(jié)合顯微鏡的特點,總結(jié)選擇合適的研究級顯微鏡時應(yīng)該考慮的核心因素。

使用什么樣的標本?


選擇研究級顯微鏡時需考慮的一件事是想探索的樣品類型。對于安裝在一片薄的玻璃片上的固定樣品,可以使用正置顯微鏡


活細胞需要不一樣的顯微鏡。培養(yǎng)細胞需要在相對較大、充滿培養(yǎng)基的培養(yǎng)容器里生存,物鏡需在樣品下方,并采用長工作距離設(shè)計,以保障物鏡不會因為達不到工作距離而無法觀察貼壁和懸浮的細胞、組織,對應(yīng)地,聚光鏡需要在樣品上方,這種結(jié)構(gòu)就是倒置顯微鏡。


左:在載玻片上放置固定樣品,例如:組織切片 
右:培養(yǎng)活細胞用的培養(yǎng)皿


圖2:左:正置的顯微鏡的特色是物鏡在樣本是上方,聚光鏡在樣本下方。
右:在倒置顯微鏡下這個組裝被逆轉(zhuǎn)以給用戶更多的空間增加物鏡對樣本的親近性。

哪種對比法適合你的樣品? 

大多數(shù)細胞呈透明狀,對比度低,難分辨細節(jié)。研究人員需使用各種對比增強方法來觀察。既可以用相差對比度(PH)和微分干涉對比度(DIC)操縱穿過樣本的光來添加對比度,也可用DAPI等熒光染料進行染色添加對比。    

根據(jù)對比的方法,顯微鏡需要特定的設(shè)備,如相差需要相稱環(huán)和PH物鏡;熒光顯微鏡需要特殊的激發(fā)塊,以允許正確的光波長度進出標本。


用不同對比方法拍攝的神經(jīng)元系列。從左到右:明場,DIC,相稱,熒光


要怎樣的光源?

對比方法的選擇也決定了用什么光源。用于常規(guī)明場顯微鏡學的透射光照明,鹵素燈和LED照明,可支持相襯和DIC。熒光觀察需要光譜覆蓋較寬的熒光光源,比如LED熒光光源或者汞燈,氙燈,或者鹵素燈,LED熒光光源因為壽命長,方便易用,已經(jīng)成為新時代主流。

是否要將結(jié)果文件化或者發(fā)布結(jié)果?    
 
  
如果你想拍攝做活細胞成像,你需要一個數(shù)碼顯微鏡相機。特別是在熒光活細胞成像的情況下,建議用一個靈敏的的相機,以盡量減少會損害細胞的激發(fā)光的總量。如明美背照式科學級sCMOS相機MSH12-BI,結(jié)合了高速率、寬動態(tài)范圍的能力,在材料和生命科學中廣泛應(yīng)用,如弱光成像、熒光成像、光譜成像、近紅外NIR成像等領(lǐng)域。


背照式科學級sCMOS相機MSH12-BI


一個易于使用的顯微鏡系統(tǒng)運行的直觀的軟件,有助于讓人們快速啟動,并迅速獲得數(shù)據(jù),簡化你的工作。如明美顯微數(shù)碼測量分析系統(tǒng),軟硬件集成一體化系統(tǒng),以高性能和易用性為目標,通過軟件控制相機,完成實時拍照、錄像、測量統(tǒng)計、實時熒光多通道合成、圖像處理等功能,支持Directshow接口攝像頭,支持中文、英文實時切換。

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來源:https://www.mshot.com/article/1393.html

發(fā)布者:廣州市明美光電技術(shù)有限公司
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