小伙伴們，我又來了~

本期給大家帶來顯微鏡物鏡的知識。

啥是物鏡，我想地球人都知道~

物鏡是顯微鏡的靈魂所在，物鏡是影響清晰度的最重要部件，先來了解下物鏡的重要參數。

在選擇物鏡時需要考慮以下幾個問題：

1、需要多大的放大倍數？

● 物鏡可以根據其放大倍率分為三大類。其中包括：低倍物鏡(2x、4x/5x和10x)，中倍物鏡(20x、40x)和高倍物鏡(60x/63x、100x)。除了物鏡的放大倍率不同外，物鏡使用的介質也不同。例如，對于高倍鏡頭(60x和100x)，經常使用浸油來獲得高分辨率。放大倍率較低的鏡頭則采用空氣作為介質。

2、選擇哪種觀察方式？

● 顯微物鏡有很多類型，應用場景也各有不同，根據觀察方式的不同，也有不同種類。一般在物鏡的外殼上會標注物鏡的觀察方式。

● BF：明場；DF：暗場；PH：相差；PO：偏光；DIC：微分干涉；FL：熒光觀察(藍、綠、紫等)；UVFL：紫外熒光觀察。

3、如何選擇一個成像效果好的物鏡？

● ①要選擇有平場矯正功能的物鏡，即標有Plan。 ②主要根據色差校正的能力來判斷成像效果：消色差物鏡（Achromatic）：僅能校正紅藍光的色差。半復消色差物鏡（FL）：能校正紅綠藍三色光的色差。全復消色差物鏡（Apo）：能對紅綠藍三色光的色差校正兩次，同時能校正紅、藍兩色光的球差。

● 看透明切片可選擇平場消色差物鏡（Ach）。看熒光可選擇半復消色差物鏡（FL），而且有長工作距離可選，既可以看玻片也可以看培養皿。若需要更好的成像效果可選擇全復消色差物鏡（Apo），但Apo物鏡沒有長工作距離的，只適用于看玻片，不適合看培養皿或培養瓶等厚的樣品。

4、對分辨率的要求是什么？

● 顯微鏡的分辨率是能分辨兩點間的最小距離，能分辨的距離越小分辨率越高。數值孔徑（NA值）與分辨率成正比，NA = n * sin α。與放大率成正比，與景深成反比。同樣的放大倍數下，NA值越高越好。在工作距離都滿足的情況下選擇NA值高的物鏡。

5、需要多長的工作距離（WD）

● 根據工作距離的不同，可以分為：①普通工作距離物鏡：工作距離小，可以觀察切片，但不能觀察培養皿。②長工作距離物鏡：用于倒置顯微鏡，可以滿足組織、懸浮液等材料的鏡檢。

6、所使用的玻片或培養板的厚度是多少？

● 在標注物鏡的光學類型的后面（∞/0）(210/0)，也就是斜杠后面這個數字代表的是適用玻片厚度，（∞/0.17）(210/0.17)，適用玻片厚度就是0.17毫米。如果用了不合適的蓋玻片，則會出現很明顯的球差（不同角度的光線沒有會聚在同一高度）從而降低成像的對比度和分辨率。NA值越高的物鏡對蓋玻片厚度越敏感，所以要選擇正規的蓋玻片。有些高NA值的物鏡以及長工作距離的物鏡有可調的蓋玻片厚度調節環可以對不同厚度的玻璃進行矯正，可用于培養皿的觀察，觀察時調節到相應的培養皿的厚度，或使用共聚焦培養皿，中間厚度也為0.17。