糞便隱血定性檢測試劑盒(鄰聯甲苯胺法)
 
一、產品簡介：
糞便的化學檢查有酸堿度反應、隱血試驗、膽色素和脂肪測定等，其中隱血試驗最具有重要的臨床應用價值。上消化道出血量小于 5ml，糞便中無可見的血液，且紅細胞破壞，顯微鏡檢查也未見紅細胞，而需要用化學法、免疫法、轉鐵蛋白法、血紅蛋白熒光測定法等才能證實的出血，稱為隱血，檢查糞便隱血的試驗稱為糞便隱血試驗(fecal occult blood test , FOBT)。化學法常用試劑有鄰聯甲苯胺、匹拉米洞、愈創木脂、無色孔雀綠、米土爾等。
雅吉生物糞便隱血定性檢測試劑盒(鄰聯甲苯胺法) 的檢測原理是血紅蛋白中的亞鐵血紅素具有類似過氧化物酶的活性，能催化 H2O2 作為電子受體使色原底物鄰聯甲苯胺氧化成鄰甲偶氮苯而顯綠色→藍色，其顏色深淺與血紅蛋白含量成正比，根據顯色的快慢可以半定量血紅蛋白即隱血含量，因此也可稱作糞便隱血半定量試驗。
本試劑盒多用于人或動物糞便血紅蛋白檢查，應注意的是正常人或動物消化道也會微量出血或受到刺激后出血，或者模型動物飼料含有魚粉、鐵劑等，都可能導致試驗結果出現假陽性。本法特點是靈敏度高、假陽性高，可檢出 Hb 0.2~1.0ug/ml。可聯合使用中靈敏度、中特異性的匹拉米洞法。本試劑盒僅用于科研領域，不用于臨床診斷或其他用途。
 
二、產品組成：

名稱規格	100T	300T	存儲
試劑(A): O-tolidine Solution	10ml	30ml	4℃ 避光
試劑(B): 氧化劑	10ml	30ml	4℃
使用說明書	一份

 
三、操作步驟(僅供參考)：
1、糞便標本應盡快收集并及時檢測，避免長時間放置使反應的靈敏度降低，避免接觸水。
2、用取樣木片或牙簽挑取少量糞便10~50mg（綠豆大小），涂在消毒棉或白瓷板上。
3、滴加 O-tolidine Solution 2 滴(約 0.1ml)于糞便不同位置。
4、滴加 氧化劑 2滴(約 0.1ml)，立即計時并觀察顏色變化。
5、于2min內判讀完畢。如2min內有藍色出現，提示糞便含有血紅蛋白(Hb)或糞便隱血試驗陽性。
  
四、結果判斷：
 

顏色變化	判讀
加入試劑后立即呈現藍黑褐色	(4+)
加入試劑后立即呈現藍褐色，并逐漸呈黑褐色	(3+)
加入試劑后初顯淺綠色，逐漸呈明顯藍褐色	(2+)
10s 后由淺綠色漸變為綠色	(+)
2min 內不顯色	陰性

五、注意事項：
1、在糞便標本采集、運送過程中和使用試劑進行檢測時，操作人員應做好個人防護，避免人體接觸，以防止可能產生的污染和自身感染。
2、正常人或動物消化道也會微量出血或受到刺激后出血，導致本法有時會出現假陽性。
3、對無任何明顯癥狀但懷疑可能有少量出現的情況，建議至少連續3天取樣，并從不同樣本部位取材做兩次實驗。
4、應提前3天以上禁止食用動物血、肉、肝臟及富含葉綠素食物、鐵劑、中藥或其他特殊藥物，以免出現假陽性反應。
5、對于結腸炎模型的實驗動物，飼料成分不應含有魚粉、鐵劑或其他特殊藥物，以免出現假陽性反應。
6、O-tolidine Solution 含有乙酸，刺激性比較大，應在通風櫥里操作。
7、氧化劑應注意密封4℃保存，6個月之后效率可能會下降。可用市售過氧化氫(30%)或過氧化脲配置1~3%的溶液。
8、如有必要可用血液或血紅蛋白溶液做梯度對照實驗。
9、本試劑盒不能與氧化劑共同存放，并避免陽光直射及高低溫儲存環境。
 
六、有效期：12 個月有效。
 
七、存儲： 4℃運輸，4℃保存。

附表 :
表 1：糞便隱血試驗化學法的干擾因素與評價

干擾因素	假陰性	假陽性
標本	糞便標本陳舊靈敏度降低，血液在腸道停留過久，血紅蛋白 被細菌降解，血紅素消失。	糞便隱血來源于非消化道出血如齒齦出血、鼻出血、月經血等。
食物和藥物	含有大量維生素C 或其他具有還原作用的食品或藥物	含血紅蛋白的動物血，如魚、肉、肝臟； 含過氧化物酶的葉綠素新鮮蔬菜；食用鐵劑、鉍劑；引起胃腸道出血的藥物如阿司匹林、皮質固醇、非固醇類抗炎藥、引起腸炎藥物、秋水仙素、蘿芙木堿、中藥等
器材和試劑	過氧化氫濃度低或失效、試劑保存溫度和濕度不當如冰凍、 受光、受熱等失效	器材污染銅離子、鐵離子、消毒劑、溴、鐵、硼酸、過氧化酶等
操作	試驗反應時間不足、顯色判斷 不準確	試驗前在標本中加水降低了靈敏度，實際 上是增高了假陽性

 
表 2：糞便隱血試驗化學法的方法學評價

方法	特點	評價
鄰聯甲苯胺法	高靈敏度假陽性高	Hb 0.2~1.0mg/L，消化道有 1~5ml 出血即可檢出。靈敏度過高方法，糞便有微量出血即呈陽性反應，故高靈敏度試驗陰性時，即確認隱血為陰性。
匹拉米洞法	中靈敏度 中特異性	Hb 1~5mg/L，消化道有 5~10ml 出血時可檢出。
愈創木脂法	低靈敏度高特異性	Hb 6~10mg/L，消化道有 20ml 出血時可檢出。受食物、藥物影響因素少，假陽性低，故如低靈敏度試驗陽性時， 即可確定為隱血陽性。

附圖：不同濃度血紅蛋白的顯色效果對比：
（從左至右血紅蛋白溶液濃度依次為 10ug/ml、50 ug/ml、200 ug/ml）
 
相關產品：
 

產品編號	產品名稱
YS0032DC	Masson 三色染色液
YS0005DG	糖原 PAS 染色液
YS0006DH	蘇木素伊紅(HE)染色液
YS00635R	水合氯醛溶液(10%w/v)
YS00644R	實驗動物標記染色液(紅色)
YS00920R	血紅蛋白溶液(1mg/ml)
YS10128R	枸櫞酸鈉抗凝劑(3.8%)
YS0511	糞便隱血定性檢測試劑盒(鄰聯甲苯胺法)
YS0711	葡萄糖檢測試劑盒(GOD-POD 微板法)
YS1167	尿素(Urea)檢測試劑盒(脲酶波氏比色法)