生物學ELISA方法在黃曲霉毒素檢測中的應用
新版 2020 藥典擴大了成熟檢測技術在藥品質量控制中的推廣和應用，如新增聚合酶鏈式反應（PCR）法、DNA測序技術指導原則等，推進分子生物學檢測技術在中藥飲片、動物組織來源材料、生物制品起始材料、微生物污染溯源鑒定中的應用。可見生物學檢測技術在越來越多的領域都將大有可為，未來可期。
某些中藥在種植、儲存等過程中易產生一些真菌毒素，如黃曲霉毒素等，對人體具有毒性，有必要加強相關真菌毒素的控制。中藥品種的原材料大多源于自然環境下生長的植物、動物或礦物，其存在有害殘留物質或污染物質的概率較髙。而黃曲霉毒素是由真菌黃曲霉和寄生曲霉產生的一類代謝產物，廣泛存在于自然界中。
由于各類真菌毒素的發生毒性的機理不同，容易受污染的對象也有所不同。因此，應選取容易受污染的中藥品種進行相應毒素檢測方法的開發。糧稃類、種子類、油性成分多的品種應注意黃曲霉毒素的檢測；處方中含有易污染的藥材以及生粉投料的中成藥品種應注意相關真菌毒素的檢測。
2015 版藥典推薦的黃曲霉毒素檢測方法是高效液相色譜或高效液相色譜-質譜（HPLC MS）聯用，2020 版藥典新增了酶聯免疫法（ELISA）的生物學檢測方法。相較于傳統的高效液相色譜或高效液相色譜-質譜（HPLC MS）聯用方法，酶聯免疫法（ELISA）在儀器成本、檢測成本、檢測時間及樣品前處理上都具有相當大的優勢，普通檢測人員可操作性高，且 ELISA 具有跟傳統方法相當的檢測靈敏度。
IKA推薦
ELISA 檢測黃曲霉毒素的實驗步驟
01
供試品粉末2g（50mL離心管）
加20ml甲醇，振蕩5min
02
渦動30s后
加san氯甲烷再次振蕩2min
03
微孔板抗體包被
加酶標抗原混勻、孵育（25°C 45min）
或底物顯色反應（25°C 15min）
*備注：搖床/高低溫混勻器需根據反應容器規格選配夾具
關于IKA
IKA是工業和科研領域世界知名的實驗室儀器設備, 分析儀器設備和加工技術制造商之一。總部位于德國施陶芬, IKA的產品和技術服務于超過160個國家的客戶。公司擁有超過900多名員工, 致力于為客戶提供優異的技術, 幫助客戶獲得成功。同時，IKA還與世界知名大學和科學家進行著密切的合作, 支持其在科研道路上不斷探索。除了位于德國的總公司, IKA現在在美國, 中國, 馬來西亞, 日本, 印度, 巴西, 韓國, 越南, 英國和波蘭均設有獨立運營的全資子公司。
——部分文案節選自《中國藥典2020年版》
某些中藥在種植、儲存等過程中易產生一些真菌毒素，如黃曲霉毒素等，對人體具有毒性，有必要加強相關真菌毒素的控制。中藥品種的原材料大多源于自然環境下生長的植物、動物或礦物，其存在有害殘留物質或污染物質的概率較髙。而黃曲霉毒素是由真菌黃曲霉和寄生曲霉產生的一類代謝產物，廣泛存在于自然界中。
由于各類真菌毒素的發生毒性的機理不同，容易受污染的對象也有所不同。因此，應選取容易受污染的中藥品種進行相應毒素檢測方法的開發。糧稃類、種子類、油性成分多的品種應注意黃曲霉毒素的檢測；處方中含有易污染的藥材以及生粉投料的中成藥品種應注意相關真菌毒素的檢測。
2015 版藥典推薦的黃曲霉毒素檢測方法是高效液相色譜或高效液相色譜-質譜（HPLC MS）聯用，2020 版藥典新增了酶聯免疫法（ELISA）的生物學檢測方法。相較于傳統的高效液相色譜或高效液相色譜-質譜（HPLC MS）聯用方法，酶聯免疫法（ELISA）在儀器成本、檢測成本、檢測時間及樣品前處理上都具有相當大的優勢，普通檢測人員可操作性高，且 ELISA 具有跟傳統方法相當的檢測靈敏度。
IKA推薦
ELISA 檢測黃曲霉毒素的實驗步驟
01
供試品粉末2g（50mL離心管）
加20ml甲醇，振蕩5min
| Tube Mill control 試管研磨機 |
 |
| IKA PETTE 移液器 |
 |
| KS 260 basic / control 圓周振蕩搖床 |
 |
渦動30s后
加san氯甲烷再次振蕩2min
| VXR BASIC 小型振蕩器 |
 |
微孔板抗體包被
加酶標抗原混勻、孵育（25°C 45min）
或底物顯色反應（25°C 15min）
| MTS 2/4 DIGITAL 酶標板震蕩器 |
 |
| Matrix Orbital Delta Plus 高低溫混勻器 |
 |
*備注：搖床/高低溫混勻器需根據反應容器規格選配夾具
關于IKA
IKA是工業和科研領域世界知名的實驗室儀器設備, 分析儀器設備和加工技術制造商之一。總部位于德國施陶芬, IKA的產品和技術服務于超過160個國家的客戶。公司擁有超過900多名員工, 致力于為客戶提供優異的技術, 幫助客戶獲得成功。同時，IKA還與世界知名大學和科學家進行著密切的合作, 支持其在科研道路上不斷探索。除了位于德國的總公司, IKA現在在美國, 中國, 馬來西亞, 日本, 印度, 巴西, 韓國, 越南, 英國和波蘭均設有獨立運營的全資子公司。
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