PEDV elisa酶聯免疫試劑盒使用說明書
瀏覽次數:3139 發布日期:2021-4-26
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PEDV elisa酶聯免疫試劑盒說明書
產品簡稱: PEDV elisa酶聯免疫試劑盒
英文名稱: Porcine epidemic diarrhea virus antibody,PEDV ELISA Kit
elisa酶聯免疫試劑盒:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
包裝:液體盒裝(48T/96T)
貯藏:2—8°C,避光防潮保存。
有效期:6個月
檢測中樣品的處理
.細胞培養物上清:細胞培養物于室溫000g,離心0分鐘后收集上清,并將標本保存于-20℃,且應避免反復凍融。
2.血清:標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于000g,4℃離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
3.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑標本采集后30分鐘內于2-8℃,000g離心5分鐘,或將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
4.尿液:無菌收集取初尿,離心除去沉淀物,即可用于檢測,要長期保存尿樣,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿樣冰凍保護液放入-20℃冰箱長期保存。
5.組織勻漿:將組織標本先用PBS洗滌,除去多余血液,勻漿化后放在PBS于-20℃放置過夜,再經過二次反復凍融破膜,5000g,4℃離心5分鐘,取上清即可檢測。注:取樣和樣品處理過程中,防止有毒物質對操作人員的危害,要采取相應的保護措施。
elisa酶聯免疫試劑盒(間接法)
() 抗原包被:用包被液將PEDV抗原作∶5稀釋包被反應板,每孔00μl,同時設陰性細胞培養物對照孔,置4℃過夜。
(2) 洗滌:用洗滌液洗滌2次,每次2min,瀝干。
(3) 加入被檢血清:用保溫液將被檢血清作∶00稀釋,加入反應板相鄰的兩個孔中,每孔00μl。同時作陰、陽性標準血清對照,置37℃孵育h。
(4) 洗滌3次:方法同上。
(5) 加入酶結合物:用保溫液將酶結合物作∶4 000稀釋,加入反應孔中,每孔00μl,置37℃孵育h。
(6) 洗滌3次:方法同上。
(7) 加入底物:每孔00μl,置室溫暗盒內顯色20min。
(8) 加入終止液:每孔50μl,靜置5min。
(9) 測定OD值:用檢測儀,于492nm波長,按儀器使用及制定標準要求調節儀器,測定各反應孔的OD值,記錄結果。
注意事項:
試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡5-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物請避光保存。
嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
本試劑不同批號組分不得混用。
0. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。