磁珠法提取核酸的操作技巧
瀏覽次數:2779 發布日期:2020-9-22
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最近有不少小伙伴問到磁力架,著實令我有點意外了,之前一直以為大家還是比較熱衷柱式提取法,畢竟小編之前讀研的時候,柱提法是我們實驗室歷代師兄師姐一路傳承下來的,我們壓根就沒想過還有更快更便捷的方法,今天我們就來聊一聊這個已經開始流行的用于核酸(DNA&RNA)的純化、片段分選的磁珠法。
說到磁珠法,那我們首先當然必須得了解磁珠,什么是磁珠呢?磁珠是利用一定的組織包被四氧化三鐵核心而形成的可以被磁鐵吸附的同時有能通過表面包被物吸附(結合)核酸的神奇的小珠子。之所以說他神奇,是因為他的用途很大!它可以實現核酸提取的自動化和高通量化。
磁珠結構
磁珠一般分為三層結構:
最內層:為支持結構,如聚苯乙烯做的內核;
中間層:磁層,作用是與磁力架上的磁鐵相互吸附,從而分離核酸與反應溶液,材料通常為Fe3O4;
最外層:修飾層,一般為帶負電的基團;
磁珠法核酸提取原理
在磁珠法的反應體系中,核酸分子(DNA & RNA)會由線性壓縮成球狀,暴露出核酸骨架上大量的負電基團與反應體系中的陽離子連接,在磁珠最外層負電基團的作用下,形成“陰離子-陽離子-陰離子”的鹽橋結構,使核酸分子被特異性地吸附到磁珠表面。而當反應緩沖液被棄除后,加入水性分子,會快速充分水化核酸分子,解除三者之間的離子相互作用,使吸附到磁珠上的核酸分子被純化出來。
磁珠法核酸提取的優勢
磁珠法DNA提取是納米科技與生物技術的完美結合,具有其它DNA提取方法不可比擬的優勢:
(1)樣本需求量低:微量的材料即可提到高濃度的核酸;
(2)操作簡單快速:整個操作流程基本分為五步(裂解、結合、洗滌、干燥、洗脫),全程無需離心操作,大多可在30~60分鐘內完成;
(3)質量穩定可靠:游離的磁珠與核酸的結合量更大,特異性的結合使得核酸純度更高,且可通過控制磁珠表面基團來調節核酸回收量;
(4)全自動化操作:采用核酸提取儀可實現自動化、高通量操作,可實現幾十甚至幾百個樣品的提;
(5)安全無毒無害:試劑不含酚、氯仿等有毒化學試劑,完全符合現代化環保理念。
磁珠法——其他應用領域
當然,除了用作核酸提取,根據不同的表面處理與標記,還可將磁珠應用到其他的領域
①.細胞分離(CD4、CD8)
可進一步用于腫瘤檢測與診斷等
②.蛋白、抗體分離(氨基磁珠、羧基磁珠、環氧基磁珠)
可進一步用于疾病的檢測與診斷等
作為一家為生命科學研究領域的研究學者提供整體打包方案的專業化高科技公司,武漢艾美捷科技可以提供全套磁珠研究系列的產品,包括:磁珠、核酸提取試劑盒和磁力架
磁珠——根據不同的表面處理與標記,可將磁珠分成各種不同的應用類型
磁珠法核酸提取試劑盒
貨號 |
名稱 |
說明 |
62500 |
Cells and Tissue DNA Isolation Kit (Magnetic Bead System) |
細胞、組織樣本DNA提取 |
62600 |
Blood DNA Isolation 96-Well Kit (Magnetic Bead System) |
血液樣本DNA提取 |
P-1059 |
EpiNext DNA Size Selection Kit |
DNA片段分選 |
P-9108 |
EpiMag Viral RNA Isolation Kit |
病毒RNA提取 |
P-2026 |
ChromaFlash One-Step Magnetic ChIP Kit |
基于磁珠法的染色質免疫沉淀 |
磁力架
貨號 |
名稱 |
說明 |
Q10002-1 |
EpiMag HT (96-Well) Magnetic Separator |
用于磁珠法分離樣品,適用于基于磁珠法的細胞、蛋白或核酸等生物樣品分離純化。
兼容所有微孔板,包括標準96孔板(0.25至0.3ml/孔)和深孔離心管(1至2ml)以及各種孔形的平板(U形、V形和平底) |
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