1.樣本選擇
都以腫瘤組織作為空間研究的對象(空間測序可以不用正常組織對照)。通過空間轉(zhuǎn)錄組測序,可以詳細分析腫瘤組織的空間細胞組成,腫瘤細胞特征,腫瘤免疫微環(huán)境特征,以及腫瘤與微環(huán)境的潛在互作關(guān)系。
2.樣本量選擇
這兩篇研究利用的腫瘤組織樣本病人分別是2例和6例,在第二篇研究中,每個區(qū)域還選取了2-3片連續(xù)切片作為生物學(xué)重復(fù)進行實驗。
3.技術(shù)平臺選擇
這兩篇研究在空間轉(zhuǎn)錄組測序的同時,分別都選擇了常規(guī)單細胞轉(zhuǎn)錄組測序作為補充。這兩種技術(shù)的聯(lián)合可以對腫瘤組織中的細胞類型進行最大精確化定義,也更能為后續(xù)的數(shù)據(jù)結(jié)果可靠性提供基礎(chǔ)。
4.后續(xù)驗證選擇
空間轉(zhuǎn)錄組測序作為一種高通量測序工具,在高分研究中,肯定需要后續(xù)的驗證工作。最常見的驗證是拿腫瘤組織進行IHC,原位雜交,免疫組化等。而像第二篇研究用到了高通量的MIBI蛋白表達技術(shù),后期有結(jié)合CRISPR技術(shù)進行功能篩選研究,都是非常值得借鑒。
參考 · 文獻
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