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Buccutite™-全新一代的蛋白交聯技術的原理與運用

瀏覽次數:1831 發布日期:2020-8-5  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
       Buccutite™交聯技術提供了一種將蛋白質與另一種大分子(例如抗體或酶)偶聯的有效方法。與常用的SMCC交聯技術相比,Buccutite™交聯技術更結實,產率更高,它利用兩個獨特的排他性的接頭:Buccutite™MTA 和Buccutite™ FOL,每個基團末端都具有一個與胺反應的基團,該基團專門與所需標記蛋白質上的伯胺反應。另一端包含我們專有的Buccutite™反應性基團,該基團僅結合其各自的Buccutite™MTA / FOL交聯劑對應物具有高度親和力。當兩種基團同時存在時,兩種結合物會在Buccutite™反應位點共價連接在一起,形成蛋白質-蛋白質結合物。
 
 
       我們的Buccutite™交聯技術提供了最方便,最有效的交聯方法,以高共軛產率連接兩種生物分子。我們的方法使用一對交聯劑:Buccutite™MTA和Buccutite™FOL。MTA被添加到一個分子上,而FOL被添加到另一分子。通過混合Molecule-1-Buccutite™MTA和Molecule-2-Buccutite™FOL引發交聯反應。該交聯反應在極其溫和和中性的條件下發生,不需要催化劑,這些獨立產品可以適應研究人員的特定材料和要求。
 
       目前,我們提供獨立的Buccutite™MTA和Buccutite™FOL試劑,以擴展Buccutite™交聯技術的應用,MTA被添加到一個分子,而FOL被添加到另一分子,然后通過混和1分子的Buccutite™MTA和1分子的Buccutite™FOL引發交聯反應,共軛試劑類型包括NHS酯,scavengers和Dye 650。
 
       1. 單獨的Buccutite™FOL和MTA產品:
 
貨號 產品名稱 規格
5350 Buccutite™FOL,NHS酯 2 umoles
5355 Buccutite™MTA,NHS酯 2 umoles
5360 Buccutite™FOL scavengers 2 umoles
5365 Buccutite™MTA scavengers 2 umoles
5370 Buccutite™MTA-Dye 650 2 umoles
5372 Buccutite™FOL-Dye 650 2 umoles
       
       2. HRP抗體偶聯試劑盒
 
       Buccutite™過氧化物酶(HRP)標記抗體試劑盒可用于制備辣根過氧化物酶(HRP)可直接標記含有游離氨基基團的蛋白質,肽和其它配體綴合物。我們試劑盒中提供的HRP已通過我們專有的鏈接器Buccutite™FOL進行了預激活,可以直接用于綴合。整個過程僅需要兩次簡單的混合,而無需進一步純化。Buccutite™FOL活化的HRP在極溫和的中性條件下無需催化劑即可輕松與Buccutite™MTA分子發生反應。
 
       Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯試劑盒
 
貨號 產品名稱 規格
5503 Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯試劑盒*針對標記100 ug蛋白進行了優化* 1 kit
5504 Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯試劑盒*針對標記1 mg蛋白進行了優化* 1 kit
5505 Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯試劑盒*針對標記25 ug蛋白進行了優化* 2次標記
 
       3. 快速標記和交聯試劑盒
 
       抗體樣本快速標記步驟
 
       Buccutite™快速標記和交聯試劑盒提供了一種快速,簡單和有效的技術,可以在微量的抗體上標記PE,APC或串聯染料。它利用兩個獨立的接頭Buccutite™MTA和Buccutite™FOL。這些接頭被分別標記到藻膽蛋白或目的抗體上,并且當混合時會牢固結合在一起,從而形成抗體-藻膽蛋白偶聯物。
 
 
Buccutite™交聯技術用于蛋白質-蛋白質綴合的簡單過程
 
       (1)快速蛋白質交聯試劑盒
 
 
快速蛋白質交聯試劑盒中Buccutite™生物綴合系統的原理圖
 
       使用我們專有的一對交聯劑:Buccutite™MTA和Buccutite™FOL,Buccutite™快速蛋白質交聯試劑盒(Cat# 1315)旨在提供一種簡便方法來生產高產率的偶聯抗體。有效的系統可以簡化如下:將MTA添加到一種蛋白質中,而將FOL添加到另一種蛋白質中。蛋白質-蛋白質交聯反應是通過將Protein-1-Buccutite™MTA和Protein-2-Buccutite™FOL混合而引發的。
 
       (2)快速抗體標記試劑盒
 
       Buccutite™快速標記試劑盒,以促進PE與抗體和其他蛋白質(例如鏈霉親和素和其他輔助試劑)的結合,Buccutite™快速抗體標記試劑盒提供了一種強大而便捷的方法來標記您的抗體。標記好的抗體適用于WB,ELISA和IHC應用。每個試劑盒均提供預活化的APC或PE,以促進與抗體和其他蛋白質(如鏈霉親和素和其他輔助試劑)的結合。我們的預活化材料已準備好進行共軛,比傳統繁瑣的基于SMCC的共軛化學具有更高的產率。該試劑盒包括一個反應緩沖液,每個足以進行2個標記反應。整個過程僅需要兩次簡單的混合,而無需進一步純化。任何新抗體的最佳比例都必須通過實驗確定,但是每個試劑盒都包含一個協議,其中推薦量供用戶參考根據具體實驗進行調整。
 
       用于快速標記和交聯試劑盒的快速抗體標記試劑盒:
 
貨號 產品名稱 規格 Ex Em
1310 Buccutite™快速PE抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微尺度優化* 2次標記 565 575
1312 Buccutite™快速PE抗體標記試劑盒*針對每次反應標記25 ug抗體的微級優化* 2次標記 565 575
1311 Buccutite™快速APC抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微尺度優化* 2次標記 651 662
1313 Buccutite™快速APC抗體標記試劑盒*經過微尺度優化,可標記每個反應25 ug抗體* 2次標記 651 662
 
       (3)快速串聯抗體標記試劑盒:
 
       PE和APC偶聯的串聯染料經常在流式細胞儀和其他應用中使用,因為它們對于多參數可視化非常有用。由于串聯染料可以被同一激光激發,但有不同的發射結果,因此使用串聯染料可以提高實驗效率。所有的Buccutite™快速串聯抗體標記試劑盒都具有相同的激發波長,PE綴合物為575 nm,APC綴合物為651 nm,但發射光譜范圍不同,這取決于每個試劑盒的次級配對染料。
 
       PE快速偶聯串聯抗體標記試劑盒:
 
貨號 產品名稱 規格 Ex Em
1318 Buccutite™PE-Texas紅色串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微量優化* 2次標記 565 600
1343 Buccutite™PE-Texas Red Tandem抗體標記試劑盒*針對每次反應標記25 ug抗體的微量優化* 2次標記 565 600
1322 Buccutite™PE-Cy5串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微量優化* 2次標記 565 674
1340 Buccutite™PE-Cy5串聯抗體標記試劑盒*優化用于每次反應標記25 ug抗體的微級* 2次標記 565 674
1316 Buccutite™PE-Cy5.5串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微量優化* 2次標記 565 700
1341 Buccutite™PE-Cy5.5串聯抗體標記試劑盒*優化用于每次反應標記25 ug抗體的微量分析儀* 2次標記 565 700
1317 Buccutite™PE-Cy7串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微量優化* 2次標記 565 780
1342 Buccutite™PE-Cy7串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應標記25 ug抗體的微級優化* 2次標記 565 780
 
       APC快速偶聯串聯抗體標記試劑盒:
 
貨號 產品名稱 規格 EX EM
1320 Buccutite™APC-Cy5.5串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微量優化* 2次標記 651 700
1350 Buccutite™APC-Cy5.5串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應標記25 ug抗體的微量優化* 2次標記 651 700
1321 Buccutite™APC-Cy7串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微量優化* 2次標記 651 780
1351 Buccutite™APC-Cy7串聯抗體標記試劑盒*優化用于每次反應標記25 ug抗體的微量分析儀* 2次標記 651 780
1319 Buccutite™APC-iFluor™700串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微量優化* 2次標記 651 713
1347 Buccutite™APC-iFluor™700串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應標記25 ug抗體的微級優化* 2次標記 651 713
 
       (4)預活化的ReadiUse™單獨和串聯染料
 
       同時我們也提供預活化的PE和APC,以促進其與抗體和其他蛋白質(如鏈霉親和素和其他輔助試劑)的結合。我們的預活化ReadiUse™染料比傳統的基于SMCC的綴合物具有更高的產率。此外,我們的預活化染料通過在蛋白質中含量豐富的氨基與每個目標蛋白質進行結合,而SMCC技術的目標是必須通過還原抗體來產生巰基。
 
       使用Buccutite™技術ReadiUse™預活化PE和APC染料
 
貨號 產品名稱 規格 Ex Em
2560 ReadiUse™預活化PE 1 mg 565 575
2561 ReadiUse™預激活APC 1 mg 651 713
 
       使用Buccutite™技術ReadiUse™預活化PE和APC串聯染料
 
貨號 產品名稱 規格 Ex Em
2580 ReadiUse™預活化PE-Cy5串聯 1 mg 565 670
2581 ReadiUse™預活化PE-Cy5.5串聯 1 mg 565 700
2582 ReadiUse™預激活PE-Cy7串聯 1 mg 565 780
2583 ReadiUse™預活化PE-德克薩斯紅串聯 1 mg 565 600
2586 ReadiUse™預激活的APC-Cy5.5串聯 1 mg 651 700
2587 ReadiUse™預激活的APC-Cy7串聯 1 mg 651 780
 
       4. Bucculite™dU摻入細胞增殖熒光成像試劑盒
 
 
用Bucculite™dU摻入的細胞增殖熒光成像試劑盒(貨號:22320)檢測到S期Hela細胞。
 
       監測細胞增殖是評估細胞活力,細胞周期和遺傳毒性的最可靠方法之一。一種檢測細胞增殖的可靠方法是在細胞周期的S期過程中,在存在胸腺嘧啶核苷的情況下檢測DNA合成。Bucculite™dU摻入細胞增殖測定試劑盒使用FOL-dU(胸苷的類似物)。FOL-dU在DNA合成過程中被摻入細胞DNA中。固定后,通過我們的Buccutite™標記技術用MTA-iFluor™共軛物標記摻入的FOL-dU。根據所使用的試劑盒,可以在Cy5,TRITC或FITC通道中可視化細胞中形成的熒光團標記的DNA。
 
       該Bucculite™的dU摻入細胞增殖試劑盒提供了一種可替代基于BrdU抗體的檢測和EdU點擊化學檢測的方法,該檢測方法無銅且對環境友好,對于在單細胞水平上測量活性DNA合成非常有效。
 
       Bucculite™dU摻入細胞增殖熒光成像試劑盒:
 
貨號 產品名稱 規格 Ex Em
22305 Bucculite™dU摻入細胞增殖熒光成像試劑盒*綠色熒光* 200 Tests 491 518
22315 Bucculite™dU摻入細胞增殖熒光成像試劑盒*紅色熒光* 200 Tests 555 565
22320 Bucculite™dU摻入細胞增殖熒光成像試劑盒*深紅色熒光* 200 Tests 649 664
       
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