大鼠表皮黑色素上皮細胞培養試劑盒使用說明書
瀏覽次數:799 發布日期:2020-5-27
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大鼠表皮黑色素上皮細胞培養試劑盒使用說明書
產品名稱:大鼠表皮黑色素上皮細胞培養試劑盒
英文名稱:Rat Skin PrimaCell: Normal Melanocytes Epithelial Cells
大鼠表皮黑色素上皮細胞培養試劑盒費用利用本公司試劑盒中提供的表皮組織分離體系來分離,EDTA/EGTA處理過的表皮組織能使得表皮組織中黑色素上皮細胞的一些功能特性發生改變,從而將黑色素上皮細胞分離開來。
本試劑盒適用于分離培養大鼠表皮黑色素上皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件,分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外,本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系,可以大程度地降低所培養的黑色素上皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠表皮黑色素上皮細胞培養試劑盒適合于培養大鼠表皮黑色素上皮細胞。本試劑盒包含:
(1)OptiTDSTM大鼠表皮黑色素上皮細胞組織解離液(3×1ml) (2)大鼠表皮黑色素上皮細胞組織處理緩沖液(100ml) (3)FibrOutTM大鼠表皮黑色素上皮成纖維抑制劑(1ml(500X)) (4)大鼠表皮黑色素上皮組織洗液(5 x 100 ml) (5)大鼠表皮黑色素上皮細胞生長因子(1ml500X)及血清(5x10ml) (6)大鼠表皮黑色素上皮細胞基礎培養基(5 x 100ml) (7)大鼠表皮黑色素上皮組織預備液(1 x 100 ml) (8)大鼠表皮黑色素上皮細胞培養試劑盒使用說明書
技術傳授:
凍存培養基
大鼠表皮黑色素上皮細胞培養試劑盒費用凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養基。
1)細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。