目前，多個主流期刊和免疫印跡專家提出了看家基因已經(jīng)不適合作為內(nèi)參使用了。因為大多數(shù)看家基因都是高豐度蛋白，其產(chǎn)生的信號大多都會接近線性動態(tài)范圍的上限，當(dāng)我們在檢測低豐度蛋白的時候，往往蛋白的上樣量會很大，易造成信號過飽和，這時候常見的內(nèi)參產(chǎn)生的信號已經(jīng)不能正確反應(yīng)上樣量的差異了。并且研究發(fā)現(xiàn)一些看家基因的表達(dá)并不是恒定的，它會隨著發(fā)育階段的不同等因素產(chǎn)生變化，所以使用看家基因的定量并不可靠。 此外，一些雜志直接提出了內(nèi)參和目的蛋白要在同一張印跡膜上，甚至直接提出最好選用總蛋白進(jìn)行歸一化，如果使用看家蛋白，則需要提供看家蛋白表達(dá)穩(wěn)定并且不受實驗條件影響的證據(jù)。  
總蛋白定量是以總蛋白(toal protein nomalization) 作為內(nèi)參對目標(biāo)蛋白表達(dá)量分析的技術(shù)。
 ·總蛋白比看家基因等內(nèi)參的線性檢測范圍更寬
·在整個實驗和系統(tǒng)中更加穩(wěn)定
·能有效排除實驗條件和體系對結(jié)果的影響
·更真實地反映目標(biāo)蛋白表達(dá)量的變化
Azure300Q多功能分子成像系統(tǒng)增加了Q模塊-總蛋白歸一化通道，使用AzureRed做總蛋白歸一化，不需要看家蛋白的一抗和二抗，節(jié)省抗體的花費，只需30min染色，步驟更簡單，最后成像即可將化學(xué)發(fā)光的目的條帶和總蛋白的條帶在同一張膜上呈現(xiàn)，通過AzureSpot總蛋白分析模塊進(jìn)行歸一化分析。