NanoAssemblr在CAR-T細胞治療的應用

瀏覽次數：5051　發布日期：2019-8-27　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

CAR-T細胞治療（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy）是近年來研究十分火熱的一種細胞免疫療法。其是一種通過嵌合抗原受體T細胞免疫治療腫瘤的新型精準靶向療法。而CAR-T細胞療法和其他細胞療法如要滿足臨床需求，就需要更安全、可擴展的非病毒載體替代品，以減少細胞加工和制造時間。電穿孔等非病毒方法可以避免一些安全性的問題，但這要權衡轉染效率和細胞活性的問題。Precision NanoSystem Inc公司的NanoAssemblr系列儀器可快速重復地生產出微升至升級別的脂質納米粒，并在敏感、難轉染細胞方面展現出較高的性能。

Precision NanoSystem Inc公司的專家們利用NanoAssemblr SPARK制備了大量不同的脂質納米粒處方，并快速篩選出一些目標mRNA以及脂質納米粒處方作為候選處方，隨后將實現良好轉染效率的脂質納米粒直接與原發性人T細胞共孵育，再從中篩選出產生了良好轉基因表達的處方。

研究首先將初步篩選出的26個候選處方分別與原發性人T細胞共孵育，通過流式細胞儀檢測發現其中部分處方產生了較高的轉基因表達（GFP），并且所有處方對T細胞的活性都沒產生明顯的影響。

隨后考察上述實驗中產生了較高轉基因表達的三組處方在多種T細胞亞型中的轉基因表達情況。結果表明，三組處方對CD4、CD8、PanT等多種T細胞亞型均產生了較高的轉基因表達。

接下來分別在T細胞激活的不同階段進行三組處方與T細胞的共培養，分別在T細胞激活前、T細胞激活后以及T細胞激活的同時加入三組處方，檢測相應轉基因表達的情況。結果顯示，第三組處方在T細胞激活的不同階段都產生了較高的轉基因表達。

隨后又在另外兩組候選處方中發現高轉基因表達在96小時時仍維持在較高的水平，并對這兩組處方在T細胞增殖、分裂的影響進行了考察，發現基因轉染并未對T細胞的增殖、分裂產生影響。

最后研究發現對不同年齡不同性別的供試者，均產生了較高的轉基因效率，其中結果中偏紫色與粉色的數據點為女性，偏藍色與綠色的數據點為男性。

從以上研究結果可以看出，利用NanoAssemblr? SPARK制備的脂質納米粒處方可以有效遞送mRNA到T細胞中并實現較好的轉基因效果，并且未對T細胞的活性與增殖、分裂產生影響。這為遞送CAR-T細胞治療所需的CAR受體到T細胞提供了寶貴的借鑒價值，也為使用脂質納米粒技術在下一代CAR-T細胞療法和其他細胞治療方面指明了方向。

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