Qioptiq iFLEX激光器應用——激光掃描共聚焦顯微
iFLEX激光器應用——激光掃描共聚焦顯微
1,什么是激光掃描共聚焦顯微
共聚焦顯微技術是近十幾年迅速發展起來的一項高新研究技術,目前應用領域擴展到細胞學、微生物學、發育生物學、遺傳學、神經生物學、生理和病理學等學科的研究工作中,成為現代生物學微觀研究的重要工具。
激光掃描共聚焦顯微鏡的主要是利用激光掃描束通過光柵針孔形成點光源,在熒光標記標本的焦平面上逐點掃描,采集點的光信號通過探測針孔到達探測器形成圖像。對于物鏡焦平面的焦點處發出的光在針孔處可以得到很好的會聚,可以全部通過針孔被探測器接收。而在焦平面上下位置發出的光在針孔處會產生直徑很大的光斑,對比針孔的直徑大小,則只有極少部分的光可以透過針孔被探測器接收。而且隨著距離物鏡焦平面的距離越大,樣品所產生的雜散光在針孔處的彌散斑就越大,能透過針孔的能量就越少(由10%到1%,慢慢接近為0%),因而在探測器上產生的信號就越小,影響也越小。正由于共焦顯微僅對樣本焦平面成像,有效的避免了衍射光和和散射光的干擾,使得它具有比普通顯微鏡更高的分辨率。
激光掃描共聚焦顯微原理示意圖
2,激光掃描共焦顯微鏡優點
共聚焦顯微技術按照顯微鏡構造原理的不同分成激光掃描共聚焦和數字共聚焦顯微技術兩種。相比于傳統的熒光顯微鏡,共聚焦顯微技術,尤其是激光掃描共聚焦顯微技術,具有成像速度快、自動化程度高、成像清晰、獲得三維圖像、進行多標記觀察、活細胞內動態生理反應的實時觀察記錄、定性定量分析等優勢。可以應用于亞細胞水平中觀察離子水平的變化并結合電生理等技術觀察細胞生理活動與細胞形態及運動變化的相互關系等。
非共聚焦與共聚焦效果對比
3,激光掃描共焦顯微鏡所用光源
激光源可以使用多譜線氬離子激光器,它提供發射波長為457nm、488nm和514nm的藍綠光;另外,氦氖綠激光器提供發射波長為543nm的綠光,氦氖紅激光器提供波長為633nm的紅光。激光源還可以用其他半導體激光器。但是,隨著共聚焦顯微技術的發展,對激光器的性能要求越來越高,功率穩定性,噪聲,光斑指向穩定性以及使用的方便性等,傳統的氣體激光器已經逐漸被性能更好地半導體激光器和全固態激光器取代。
4,瞬渺能夠提供的產品
激光掃描共聚焦顯微通常使用可見光波段的激光,如405nm,488nm,561nm,640nm等幾個波長。上海瞬渺光電代理的德國Qioptiq的iFLEXTM系列激光器波長范圍覆蓋375nm—852nm,功率范圍從幾毫瓦到100毫瓦以上。此外,QioptiqiFLEXTM系列激光器還具有以下幾個特點:
1)采用iFLEX技術,光纖即插即拔,空間光與光纖耦合自由轉換;
2)內置CLM(閉環調制)功能,可進行數字和模擬調制,帶寬可達5MHz;
3)功率可調,調節范圍0.1%-100%;
4)高功率穩定性,穩定度達<0.5%(8小時),且穩定性隨著功率調節不變;
5)RMS噪聲可達0.05%,峰峰噪聲達0.5%;
6)光束指向穩定性<1μrad/℃
5,解決方案
我們曾經為上海交通大學,中科院某研究所,南京大學,蘇州**醫療科技有限公司等多個研究單位和企業提供激光光源解決方案。主要有以下兩種:
1)單波長激光器合束
iFLEX-iRIS系列單波長激光器,經過Adder合束器,最終通過光纖輸出多波長激光;
iFLEX-iRIS系列光纖耦合激光器 + 光纖合束器iFLEX-Adder™
2)多波長激光器
iFLEX-Gemini系列和iFLEX-Viper系列將不同波長的激光器集成到同一個激光頭內,通過光學耦合作用,可以同時輸出兩個和兩個以上波長的激光,最多可以集成5個波長的激光器,且可以任意切換波長。
iFLEX-Gemini雙波長激光器 iFLEX-Viper多波長激光器