腸桿菌科細(xì)菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個過程：在合成過程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉(zhuǎn)化氨基酸和細(xì)胞內(nèi)其他含氮化合物；在分解代謝過程中，硝酸鹽戒亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體。能使硝酸鹽還原的細(xì)菌從硝酸鹽中獲得氧而形成亞硝酸鹽和其他還原性產(chǎn)物。

 

硝酸鹽還原實驗試劑主要由對氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液組成，主要用于鑒別腸桿菌、假單胞菌等。大腸埃希菌等細(xì)菌僅能使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，亞硝酸鹽與乙酸作用生成亞硝酸，亞硝酸鹽與試劑中的對氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸，后者與α-萘胺結(jié)合生成紅色產(chǎn)物；假單胞菌、沙雷菌等細(xì)菌能使硝酸鹽戒亞硝酸鹽還原為氮戒氧化氮，

該作用被稱為脫硝化戒脫氮化作用，產(chǎn)生氣泡，但無紅色出現(xiàn)。

 

 

1、 硝酸鹽培養(yǎng)基

2、 恒溫培養(yǎng)箱

3、 試管

 

1、 被檢細(xì)菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基，35℃培養(yǎng) 1～4 天。

2、 取適量的對氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液等量混合后即為硝酸鹽還原實驗試劑。

3、 取 0.1ml 硝酸鹽還原實驗試劑，加入培養(yǎng)基中，立即觀察結(jié)果。

4、 如果實驗呈陰性反應(yīng)，在試管中加入少許鋅粉，立即觀察結(jié)果。

 

 

注意：加入試劑無顏色反應(yīng)，可能原因：1、硝酸鹽沒有被還原，實驗確為陰性；2、硝酸鹽被還原為氨和氮等其他物質(zhì)，迚而導(dǎo)致假陰性。這時可加入少許鋅粉，如出現(xiàn)紅色則說明實驗確為陰性，如果未出現(xiàn)紅色則說明實驗為假陰性。

 

1、 如果要檢查是否有氮氣產(chǎn)生，可在培養(yǎng)管內(nèi)加一個小倒管，看有無氣泡產(chǎn)生。

2、 取細(xì)菌培養(yǎng)和實驗中，應(yīng)注意自我防護(hù)。

3、 待檢細(xì)菌培養(yǎng)時間也會影響染色，陽性菌培養(yǎng)時間過長戒已死亜戒細(xì)菌溶解，都常呈陰

性反應(yīng)。

4、 某些厭氧菌(韋榮球菌)亦呈陽性反應(yīng)。

5、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期： 12 個月有效。