樹突細(xì)胞來源miRNA在紅斑狼瘡疾病中的重要作用

研究背景

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種復(fù)雜的自身免疫性疾病，其發(fā)病機(jī)制目前還不是很清晰。樹突細(xì)胞（DCs）在免疫系統(tǒng)中扮演著重要的角色，與SLE的發(fā)生關(guān)系密切。來自復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院的研究人員，以樹突細(xì)胞為研究對象，深入探究了miRNA在SLE疾病中的重要作用。

研究思路

研究結(jié)果

1、moDCs在SLE中的促炎癥功能鑒定

產(chǎn)生細(xì)胞因子是DC細(xì)胞的重要功能之一，我們首先分析了SLE病人和正常人來源的單核細(xì)胞源DCs(moDCs)分泌的細(xì)胞因子和趨化因子。結(jié)果顯示，在病人的moDCs中，IL-6，CCL2和CCL5表達(dá)顯著升高。同時(shí)，Transwell assay也顯示，moDCs培養(yǎng)細(xì)胞上清中富含更多的CD4+T細(xì)胞。因此，通過第一部分的實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)了SLE病人DC細(xì)胞中異常表達(dá)的炎癥因子表達(dá)。

2、moDCs中的miRNA表達(dá)模式分析

由于miRNAs在DCs功能發(fā)揮中的重要作用。因此，我們通過miRNA表達(dá)譜芯片，分析了SLE病人和正常人的培養(yǎng)moDCs的miRNA表達(dá)模式。結(jié)果顯示，一共有18個(gè)miRNAs在SLE中異常表達(dá)，其中，有8個(gè)上調(diào)，10個(gè)下調(diào)。

通過對miRNA預(yù)測靶基因的功能和通路分析，我們對富集到重要功能的7個(gè)miRNA (miR-142-3p, miR-630, miR-671-5p, miR-15b-5p, miR-181b-5p, miR-125a-5p和 miR-5703)進(jìn)行了進(jìn)一步的分析。針對15個(gè)病人和15個(gè)健康人樣本的qRT-PCR驗(yàn)證，我們發(fā)現(xiàn)miR-142-3p, miR-630, miR-15b-5p, miR-181b-5p, miR-125a-5p, and miR-5703的表達(dá)與芯片結(jié)果一致。

在這些miRNA中，我們對miR-142-3p格外關(guān)注，因?yàn)橛醒芯堪l(fā)現(xiàn)它是血液干細(xì)胞和造血干細(xì)胞的形成中有重要作用，且對CD8+ T細(xì)胞增殖和巨噬細(xì)胞組成由重要作用。對miR-142-3p的靶基因功能富集也顯示，主要參與細(xì)胞因子和趨化因子調(diào)控。因此，miR-142-3p很有可能在SLE中有重要的免疫調(diào)控作用，我們把miR-142-3p作為后期功能驗(yàn)證的重點(diǎn)。

3、miR-142-3p生物學(xué)功能研究

那么，miR-142-3p在moDCs中扮演了什么樣的角色呢？我們運(yùn)用慢病毒轉(zhuǎn)染，構(gòu)建了miR-142-3p過表達(dá)細(xì)胞系。對細(xì)胞因子和趨化因子檢測，我們發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)細(xì)胞中的IL-6，TNF-α，CXCL8，CCL5的表達(dá)都顯著增加。因此，細(xì)胞中的過表達(dá)模擬了SLE病人的免疫因子變化。

DC細(xì)胞誘導(dǎo)的T細(xì)胞啟動(dòng)對SLE的發(fā)生有重要的作用。因此，我們對moDCs上清中的CD4+ T細(xì)胞進(jìn)行了鑒定，發(fā)現(xiàn)miR-142-3p過表達(dá)細(xì)胞系中有更多的CD4+ T細(xì)胞遷移。深入的實(shí)驗(yàn)表明，CD4+CD25+Foxp3+ T細(xì)胞在過表達(dá)的CD4+ T細(xì)胞中比例降低，IL-17表達(dá)顯著增加。因此，miR-142-3p影響了 moDCs和CD4+ T細(xì)胞的交互作用。

研究結(jié)論

我們的研究通過對SLE病人的moDCs的miRNA表達(dá)模式分析，發(fā)現(xiàn)了特異性高表達(dá)的miRNA: miR-142-3p。后期的功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明，miR-142-3p促進(jìn)細(xì)胞因子和趨化因子的產(chǎn)生，吸引更多的CD4+T細(xì)胞，減少Treg擴(kuò)散。本研究表明，miR-142-3p可能是一個(gè)SLE的新的治療靶點(diǎn)。
本研究miRNA表達(dá)譜芯片由上海伯豪生物技術(shù)有限公司提供。

原文出處： Wang Y, Liang J, Qin H, et al.Elevated expression of miR-142-3p is related to the pro-inflammatory function of monocyte-derived dendritic cells in SLE . Arthritis Res Ther. 2016.