作為世界范圍內第一大常見腫瘤,肺癌也是臨床科學研究的一大熱門領域。據不完全統計,肺癌相關的國自然項目接近腫瘤項目總數的10%,每年發表SCI文章逾萬篇。縱觀這些標書和文章,最經典的思路就是研究某個抑癌基因的失活或者原癌基因的激活了。那么問題來了,如何根據實驗需要,對目的基因進行有效的操作呢? 古人云“工欲善其事,必先利其器”。對于這些操作工具的了解,其實也不可小視。
今天就給大家分享肺癌研究中,慢病毒工具的應用,14年的經驗積累傾囊送出,包括吉凱獨家的預實驗數據哦~一目了然有木有?
慢病毒是一種實現高效體外體內細胞感染的工具。慢病毒能夠將外源基因整合入宿主細胞的基因組,使其隨細胞增殖穩定表達,并且對分裂期和非分裂期的細胞均有較高感染能力,加之其安全性高、毒性低的特點 , 慢病毒已經成為現代細胞生物學研究中一種廣泛應用的基因傳遞工具。
一、我的實驗需要哪種慢病毒載體?
啟動子、熒光標記、抗性標簽是我們選擇載體需要考慮的三大要素。實驗不同,這些元件也需要相應變化。下圖幫大家梳理了常用載體的選擇方案,看一看,是否清晰了呢?
二、我需要哪種細胞模型?慢病毒感染效果如何?
做肺癌研究的筒子可不用擔心沒好用的工具細胞,這里有各種腺癌、鱗癌、大/小細胞及其他肺癌的常用細胞系,再也不怕用錯細胞啦!每株細胞都配有吉凱獨家的預實驗數據和吉凱病毒發表的參考文獻,快來瞅瞅吧~
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三、細胞實驗效果不錯,那動物實驗怎么做?
肺癌研究中動物實驗主要分為兩種類型:I成瘤實驗;II 病毒直接注射動物。
Ⅰ.成瘤實驗的操作較為常規,先在體外使用病毒感染細胞,再將感染好的細胞注射入動物體內成瘤。接種手法根據接種部位的不同而不同,肺癌中用到最多的還是皮下和原位兩種。
*注:原位成瘤時,若不剖開體表成像,推薦使用luciferase。
Ⅱ.病毒直接注射動物。大家注意了,因是活體注射,能夠注射入動物體內的病毒體積有限,此類實驗對病毒質量要求更高。所用的病毒需經過特殊純化處理,確保滴度高,毒性小,不易引起炎癥反應。此處以瘤內注射為例。
上海吉凱基因化學技術有限公司成立于2002年,擁有BSL-2級別的慢病毒包裝實驗室。病毒生產線通過ISO9001質量管理體系驗證,月均定制基因病毒產品包裝超過1000次。慢病毒生產采用6項QC檢測、病毒純度分級純化以及病毒滴度絕對定量檢測確保病毒質量。
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四、參考文獻
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