BIOG細胞RNA抽提試劑盒使用說明書
運輸條件：常溫運輸
貨 號：51021: 50次反應
51022: 100次反應
產品特點
◎操作簡便快速，可在半小時內完成操作；
◎提取RNA純度高，無抑制劑，A260/A280為1.8-2.0；◎產率高，同樣的樣本量提取的RNA更多；
◎標本范圍寬，適合于各種培養細胞、針刺吸取物、尿沉渣細胞等細胞離散標本；
◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑，安全無毒。
試劑盒組成
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組分 |
50次 |
100次 |
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吸附柱和收集管 |
各50個 |
各100個 |
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裂解液 |
12 mL |
24mL |
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析出液 |
4.5 mL |
9 mL |
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洗滌液 |
9 mL |
18 mL |
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洗脫液 |
12mL |
24 mL |
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消化液 |
1.2 mL |
2.4 mL |
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說明書 |
1份 |
1份 |
產品介紹
BIOG RNA Cell Kit是我公司研發的專門用于從各種細胞樣本中提取基因組RNA的試劑盒。提取的樣本范圍包括各種培養細胞、細菌、針刺吸取物、尿沉渣細胞等細胞離散標本。BIOG RNA Cell Kit采用復合消化液消化細胞中的蛋白質，使細胞RNA更容易釋放出來，因而本試劑盒RNA提取產率較高。BIOG RNA Cell Kit采用了最新的離子膜技術并反復優化了裂解液和洗脫液配方，提取得到的RNA純度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂類等雜質污染，可以直接應用于Northern 雜交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文庫構建、體外翻譯等各種常規分子生物學實驗。
操作步驟：
1.請自行準備：無水乙醇、PBS及無RNA酶的1.5mL離心管。
2.取出析出液和洗滌液，按以下操作：
a) 析出液：4.5mL加入25.5mL無水乙醇；9mL加入51mL無水乙醇。
b) 洗滌液：9mL加入21mL無水乙醇；18mL加入42mL無水乙醇。
c) 配制好的析出液如出現沉淀，可在37℃溶解，搖勻后使用。
3.細胞處理：a) 培養板培養的單層貼壁細胞，棄培養基，PBS清洗一遍，棄PBS；
b) 培養瓶培養的貼壁細胞應先用胰酶消化，處理為細胞懸液， 1,000 rpm 離心 5分鐘，徹底棄去上清，加入100μL PBS振蕩至細胞懸浮；
c) 培養的細胞為懸浮細胞，1,000 rpm 離心 5分鐘，徹底棄去上清，加入100μL PBS振蕩至細胞懸浮。
4.加入200μL裂解液，20 μL 消化液，充分振蕩混勻，56℃水浴10 分鐘至細胞完全裂解。
5.加入500μL析出液，輕輕顛倒混勻，如有半透明懸浮物，不影響RNA的提取與后續實驗。
6.將吸附柱放入收集管內，將上述溶液轉入吸附柱內，靜置2 分鐘，12,000 rpm 4℃離心1 分鐘，棄收集管內廢液。
7.將吸附柱放回收集管內，加500μL 洗滌液至吸附柱內，12,000 rpm 4℃離心1 分鐘，棄收集管內廢液。
8.將吸附柱放回收集管內，12,000 rpm 4℃離心2 分鐘，離去殘留的洗滌液。
9.取出吸附柱，放入新的無RNA酶的1.5 mL 離心管內，加入50-200μL 洗脫液，靜置3 分鐘，12,000 rpm 4℃ 離心2 分鐘，收集RNA溶液。
10.-70℃保存，或直接用于下一步實驗。
注意事項
- 為防RNA酶污染，實驗過程中最好戴一次性干凈手套、口罩，使用處理過的無RNA酶的容器和無RNA酶的超純水。
- 析出液、洗滌液均含有刺激性化學物質，請做好防護措施，避免直接接觸皮膚，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛，請立即用清水或生理鹽水沖洗，必要時請就醫。
- 細胞量建議不高于107。
- 裂解液如有白色絮狀物析出屬正常現象，置于37℃水浴中溶解即可。
儲存、運輸和有效期
本試劑盒可常溫運輸，室溫（15-25℃）保存，有效期為12個月，消化液請于-20℃存放，避免反復凍融。
質量控制
本產品經嚴格的質量檢驗證明，無生物污染
注意 本產品僅用于科研實驗
常州百代生物科技有限公司
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