1．把氮氣供應管連接到厭氧箱的“厭氧氣接口”上，厭氧氣供應管暫不連接。
　　
2．打開氮氣鋼瓶上的閥門，調節減壓閥使低壓表壓力在0.1Mpa，并檢查所有連接是否有泄漏。
　　
3．把抽真空開關、氮氣開關和均衡開關打到自動位置，再打開氣體總開關到On的位置。
　　
4．逆時針旋轉手動充氣閥，并完全打開。
　　
5．當起泡器冒泡時，按一下開始鍵，真空泵啟動并會自動停止，然后自動加氣。
　　
6.關閉氮氣氣源，把氮氣供應管換到氮氣口上，把厭氧氣供應管連接到厭氧氣接口上，并調節好壓力。
　　
7．完成后關閉手動充氣閥，把催化反應風機開關打到On的位置。
　　
8．大約1個小時后，檢查厭氧培養箱內的氧氣含量，應在1%以下。