Western樣品制備方法簡(jiǎn)介
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| 1、細(xì)胞抗原的處理方法 向收集到的細(xì)胞中加入RIPA裂解緩沖液（蛋白酶抑制劑在使用前加入，終濃度為2ug/ml）在冰上裂解30-60min，然后再插入冰盒進(jìn)行超聲，超聲強(qiáng)度以不產(chǎn)生泡沫為宜，超聲每次2-3s，重復(fù)3或4次，12000g離心3-5min，吸取上清備用。 2、 組織抗原的處理方法 將組織從動(dòng)物體內(nèi)取出（樣品不宜反復(fù)凍融），取少量（1-2g）放入玻璃勻漿器中研磨成勻漿，然后轉(zhuǎn)入微量離心管中進(jìn)行超聲，超聲強(qiáng)度以不產(chǎn)生泡沫為準(zhǔn)，超聲每次5-7s，重復(fù)5或6次，再12000r/min，離心3-5min，吸取上清備用。 上述兩種方法得來的樣品處理液還要加入1/4體積左右的電泳上樣緩沖液，然后放在沸水浴中加熱3-4min使蛋白質(zhì)變性，方可作為樣品準(zhǔn)備行凝膠電泳。 | ||||||||||||||||||||
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細(xì)菌抗原、分泌上清樣品、經(jīng)抽提純化的蛋白質(zhì)樣品可以直接加入電泳上樣緩沖液，然后在沸水浴中加熱3-4min使蛋白質(zhì)變性。 | ||||||||||||||||||||
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閱讀原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050004.html
標(biāo)簽：
聯(lián)科、聯(lián)科生物。
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