樣品制備

辣椒油（辣椒）購自商業(yè)來源。將0.1 g此樹脂樣品溶于1 mL己烷中。用3 mL己烷活化Sep-Pak硅膠小柱（6 mL，500 mg，部件號(hào)WAT043400），然后上樣稀釋樣品。用2 mL己烷清洗小柱，然后用2 mL乙腈/二氯甲烷（5:95）洗脫。蒸干洗脫液，用150 μL甲醇復(fù)溶。SPE采用了具有最低真空度的真空導(dǎo)管，在所有步驟中液體均能以2 mL/min的流速通過小柱。

結(jié)果與討論

結(jié)果見表2。本研究中測(cè)定的蘇丹紅染料包括酚類（如蘇丹紅一號(hào)）、多酚類（如蘇丹橙G）和胺類（如蘇丹黑）。由于Sep-Pak硅膠小柱能有效保留10種目標(biāo)分析物染料，因此被選用于SPE純化。雖然回收率一般在75%至100%之間，但多酚類蘇丹橙G的回收率只有約50%。與其它染料相比，此化合物在硅膠SPE小柱上的保留性更強(qiáng)。通過增加洗脫體積或提高洗脫溶劑中乙腈的百分含量可提高回收率。然而，這些步驟都會(huì)使最終萃取物中深色基質(zhì)化合物含量變多，從而使純化效果明顯變差。圖3展示了獲得的純化樣品，左側(cè)樣品瓶中為SPE處理前從溶于己烷的1.0 mL樣品中取出的一份150 μL樣品，右側(cè)樣品瓶中為SPE處理后復(fù)溶于150 μL甲醇的樣品。SPE方案不僅顯著提升了萃取物的純凈度，還將萃取物濃縮了將近7倍。

CORT ECS 2.7 μm實(shí)心顆粒色譜柱具有出色的色譜性能，并且進(jìn)樣200多次均保持一致的性能。圖4顯示了加標(biāo)100 ng/g（ppb）樣品的典型分析色譜圖。本次分析在ACQUITY UPLC H-Class系統(tǒng)上進(jìn)行。此系統(tǒng)經(jīng)設(shè)計(jì)不僅可在UPLC壓力和流速下提供優(yōu)異的性能，而且在諸如本文研究使用的HPLC條件下同樣具有出色表現(xiàn)。由于本研究中觀察到的色譜柱反壓約為3100 psi，因此在壓力上限為4000 psi甚至更高的傳統(tǒng)HPLC儀器上進(jìn)行分析不會(huì)出現(xiàn)問題。對(duì)于需要真正UPLC性能的分析人員來說，可將分離轉(zhuǎn)移至CORTECS C₁₈，1.6 μm實(shí)心色譜柱上進(jìn)行分析。

結(jié)論