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振動切片方法及與石蠟、冰凍切片的比較

瀏覽次數:6723 發布日期:2013-12-27  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
振動切片用振動切片機,可以把新鮮組織(不固定不冰凍)切成厚片20~10μm,以漂浮法在反應板進行免疫組織化學染色,然后在解剖顯微鏡下檢出免疫反應陽性部位,修整組織進行后固定,最后按電鏡樣品制備、脫水、包埋、超薄切片、染色觀察等。組織不冰凍,無冰晶形成和組織抗原破壞,在免疫組化染色前避免了組織脫水、透明、包埋等步驟對抗原的損害,能較好地保留組織內脂溶性物質和細胞膜抗原,主要用于顯示神經系統抗原分布研究。醫學教育`網搜集整理這種包埋前染色,尤其適用于免疫電鏡觀察。
 
振動切片方法是利用刀片振動原理,用來將新鮮的活體組織或固定過的組織切成20微米的薄片到1毫米以上厚片的儀器。一般厚度精度控制大約為1微米,如果做熒光染色建議切成薄片。

對于成年小鼠或胚胎腦部、脊髓、肝臟、眼睛及其他器官組織,我們的方法是用低熔點瓊脂糖包埋,然后將封裝在瓊脂糖里的組織進行切片,取下的組織厚片可以浸泡在如六孔板內進行組織化學或免疫組織化學染色。然后,用激光掃描共聚焦顯微鏡或雙光子顯微鏡等進行觀察。而對于或新鮮活體組織則不需要包埋,直接固定在切片槽中切片。

與石蠟切片、冰凍切片方法比較:
振動切片方法簡單、快速,能使組織比較完整保留,適合做或組織電生理學等研究。與冰凍切片相比,不需要對組織冷凍,不會形成冰晶或造成組織抗原的破壞。與石蠟切片相比,不需要脫水、透明、浸蠟等過程,避免對抗原的損害。

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