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Gradiflow 技術(shù)在蛋白質(zhì)分離研究中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):3196 發(fā)布日期:2011-12-22  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
電泳是現(xiàn)代蛋白質(zhì)研究常用和有效的工具,但是電泳過程中所產(chǎn)生的熱量對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的破壞,以及目的蛋白從蛋白膠或其他介質(zhì)中低的回收效率等等問題,常常讓蛋白質(zhì)更深入的研究戛然而止,而Gradiflow 技術(shù)的應(yīng)用解決了研究者頭疼的難題 !
 
Gradiflow 技術(shù)要點(diǎn)可以簡單概括為如下幾點(diǎn):
1. 應(yīng)用不同孔徑大小的聚丙烯酰胺分離膜片;
2. 基于蛋白質(zhì)或多肽的分子量或(和)等電點(diǎn)來分離;
3. 不同等電點(diǎn)的蛋白質(zhì),在不同PH的緩沖液中,帶電性質(zhì)不一樣;
4. 不同分子量大小的蛋白質(zhì)通過不同孔徑大小的分離膜。
 
Gradiflow 技術(shù)在蛋白質(zhì)分離研究中有如下杰出的表現(xiàn):
1. 抗體的純化
在大多數(shù)抗體的應(yīng)用過程中,對(duì)純度都有一定的要求,通常研究者喜歡采用純化方法是沉淀法和親和層析法,但是抗體的來源卻常常會(huì)限制研究者的純化工作。然而Gradiflow 技術(shù)卻能夠解決這樣的問題,不論是多抗,還是單抗,不論是羊源抗體,兔源抗體,還是牛源,人源等抗體,都能夠被純化。
 
多克隆抗體的純化實(shí)例:
 
Recovery of Ig from Gradiflow and affinity chromatography
 
2. 蛋白質(zhì)組預(yù)分離
2DE是研究者常用的蛋白質(zhì)組分析方法,這種方法很有用,但是它的限制因素在實(shí)驗(yàn)過程中逐漸呈現(xiàn)出來,比如一些膜蛋白,高分子量和低分子量的蛋白質(zhì),就很難用2DE檢測(cè)出來。特別是一些蛋白樣品中包含高豐度的蛋白質(zhì),這樣就很有可能將研究者感興趣的蛋白質(zhì)掩蓋,在2DE圖譜上體現(xiàn)不出來,從而減少了所檢測(cè)到的蛋白質(zhì)的數(shù)量。而采用Gradiflow技術(shù)對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)分離之后,在進(jìn)行2DE實(shí)驗(yàn),就能夠輕而易舉的解決上面的問題。
 
應(yīng)用Gradiflow技術(shù),在非變性條件下,血漿中HAS的去除實(shí)例:
 
 
 
 
 
 
NuSep 公司08年推出的ProteomeSep MF10 繼承了Gradiflow 的技術(shù),并對(duì)整個(gè)系統(tǒng)加以完善和改進(jìn),成為蛋白質(zhì)預(yù)分離的新生代利器!

 
發(fā)布者:廣州進(jìn)科馳安科技有限公司
聯(lián)系電話:17620093784
E-mail:marketing@bio-gene.com.cn

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