膠體金快速診斷試劑在瘦肉精檢測中的應用:
瘦肉精是一類動物用藥,它可以起到減少脂肪增加瘦肉的作用。目前在中國瘦肉精主要為克侖特羅(clenbuterol),它屬于β-興奮劑(β-agonist)藥物。克侖特羅有很危險的副作用,輕則導致心律不整,重則導致心臟病發作。
目前檢測瘦肉精的技術主要包含膠體金法、高效液相色譜(HPLC)、液質聯用等方法。其中膠體金免疫層析法以其快速、簡單、便利等優點,日益成為一種重要的方法。
膠體金免疫層析法 (Immune colloidal gold technique) 是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種免疫標記技術。膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,聚合成為特定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態。
根據不同的還原劑可以制備大小不同的膠體金顆粒。常用來制備膠體金顆粒的方法如下:
1.白磷還原法
2.枸櫞酸三鈉還原法。
3.鞣酸—枸櫞酸鈉還原法。
純水在膠體金生產過程中的重要性:
1.水中的離子雜質會改變pH值及離子強度。pH值對最終的顆粒大小有一定的影響。溶液的顏色和其pH值相關聯。離子強度影響膠體金與蛋白質的成功結合,或導致膠體金粒子的凝聚,降低膠體金的檢測能力。
不同金顆粒大小對溶液顏色的影響
2.有機物除了可能改變pH值外,還會與蛋白質形成結合體。或者不穩定容易失活,或者影響探針的靈敏度。干擾蛋白-金復合體的制備。
3.顆粒會干擾膠體金顆粒的生成,形成的顆粒大小不一,顏色微紅、無色或混濁不透明。
好的膠體金 渾濁的膠體金
微生物會產生代謝產物,并且微生物死亡時細胞裂解也會產生大量雜質。帶來諸如顆粒,有機物,離子等各種雜質,從各方面影響膠體金。
因此,制備膠體金務必使用有品質保證的超純水。必須使用離子交換樹脂去除離子,使用活性炭及紫外燈去除有機物,使用膜過濾去除顆粒及微生物等等。