久热久草在线_一一高清视频在线观看_在线观看91av_久草免费在线观看视频_国产精品午夜无码A体验区_国产一级高清

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 用于生產MSCs的大鼠骨髓原代培養

用于生產MSCs的大鼠骨髓原代培養

瀏覽次數:1900 發布日期:2010-11-30  來源:www.pricells.com.cn

用于生產MSCs的大鼠骨髓原代培養

試劑和材料:
1. 完全培養基(CCM):α-MEM:α-低限量基礎培養基,含谷氨酰胺,無核苷酸或脫氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、經FBS雜交瘤純化,非熱滅活、青霉素100U/ml、鏈霉素100μg/ml。含0.2μg/ml兩性霉素B。過濾除菌。儲存于4℃,不超過2周;
2. PBSA;
3. 塑料組織培養Petri培養皿,15cm直徑;
4. 聚丙烯離心管,15ml和50ml;
5. 0.85%臺盼藍鹽溶液;
6. 改良的Neubauer血細胞計數器;
7. Eppendorf 5417C微量離心器或同等設備;

實驗方法:
1. 從一根股骨所得的骨髓懸液中取出10μl,與10μl臺盼藍混合,評估存活率,確保高于80%;
2. 1000g離心10min沉淀骨髓;
3. 用25ml預熱的含抗真菌藥物的CCM重懸骨髓(處理大鼠骨髓細胞使用抗真菌藥物,人骨髓細胞不使用);
4. 將25ml細胞懸液加入到15ml直徑的組織培養板中,37℃,5%CO2環境下至少孵育15h;
5. 從培養箱中取出培養板,吸出培養基;
6. 用20ml預熱的PBSA潤洗單層細胞。重復潤洗過程3次,將最后的洗滌產物加入30ml預熱的含抗菌藥物的新鮮CCM中(只有大鼠細胞使用抗真菌藥物);
7. 如有需要每隔兩天重復步驟6,維持6—14天;
8. 每3天用倒置顯微鏡觀察單層細胞。貼壁、成纖維細胞樣的MSCs集落可以在培養板中清洗可見。某些情況下,這可能是造成細胞污染的信號,但這些細胞隨著細胞傳代過程可被去除。當培養物達到40%—50%匯合時,按照MSCs自我更新的集落形成單位測定的方法處理細胞。這些MSCs標記為0代;

發布者:武漢原生原代生物醫藥科技有限公司
聯系電話:027-87490190
E-mail:service@pricells.com.cn

標簽: 原代細胞
用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 日日摸夜夜添夜夜躁好吊 | 亚洲ΑV在线观看天堂无码 日日夜夜操操操操 | 国产一区二区三区视频在线观看 | 国产激情片 | 久久久久成人精品亚洲国产 | 一级毛片在线免费播放 | 亚洲视频免费观看 | 亚色网站 | 国内精品免费久久久久软件 | 日韩在线视频线视频免费网站 | 色婷婷综合久久久久中文图片 | 日韩网站在线 | 成人无码精品免费视频在线 | 久久久无码人妻精品一区二区三区 | 国产毛片久久 | 成人啪啪178| 久久久久久国产精品日本 | 国产亚洲精品二区 | 国产精选一区二区 | 二区免费| 久久国产精品视频免费看 | 日本中文字幕亚洲 | 国产乱淫av公 | 日韩精品1区 | 色老头av亚洲一区二区男男 | 精品毛片一区二区三区 | 性感美女一级毛片 | 亚洲成av人在线观看网址 | 99视频精选 | 国产草b | 91免费国产高清观看 | 色wwwwww| 国产在线拍偷自揄拍视频 | 国产在线日韩欧美 | 国产一区 中文字幕 | 亚洲伊人无码一区二区三区 | 美欧精品视频一区二区三区 | 18一20岁一级毛片 | 在线播放精品 | 成人免费av在线播放 | 久久精品无码一区二区无码三区 |