YU.2003.7

利用不同容量的角式轉(zhuǎn)頭及很容易配制的梯度液，在各種型號(hào)的超速離心機(jī)上都能得到滿意的分離結(jié)果。下面舉了幾個(gè)分離實(shí)例，實(shí)際上還可以應(yīng)用于各種型號(hào)各種容量的固定角式轉(zhuǎn)頭。

（一）   梯度液

A液：11.40gNacl，0.1g EDTA-Na2，置于1000ml量筒中加入500ml重蒸水及1

ml 1N NaOH，混勻至全部溶解。加重蒸水至1000ml最后再加3ml重蒸水（Nacl：0.195mol）。終密度1.006g/cm³，PH10.37。

B液：加24.98g NaBr 到100ml A液中。終密度1.182g/cm³。（Nacl：0.195mol， NaBr：7.65mol），PH9.72。

C液：加78.32g NaBr 到100ml A液中。終密度1.478g/cm³。（Nacl：0.195mol， NaBr：7.65mol），PH8.86。

（二）   離心機(jī)及轉(zhuǎn)頭

• 離心機(jī)：Hitachi CP-MX系列超速離心機(jī)或其他類似機(jī)組。

Hitachi CS-150GXL微量超速離心機(jī)。

• 轉(zhuǎn)頭，離心管；S 140 AT：140,000rpm,1,050,000×g，10×2ml，K=5，1PC厚壁管。

S 80 AT3：80,000rpm,415,000×g，8×8ml，K=23，6PC厚壁管。

S 70 AT：70,000rpm,505,000×g，8×40ml，K=44，40PA管。

（三）   血漿-血球分離：

全血，角轉(zhuǎn)頭或甩平轉(zhuǎn)頭3000rpm×20min，沉淀為血細(xì)胞，上清血漿待用。

（四）   乳糜粒分離：

      • 離心參數(shù)：各種轉(zhuǎn)頭均可用，4×10⁶（g×min），10℃

• 梯度液：離心管下部3/4容積為血漿，上部1/4容積為0.15MNacl+0.3MEDTA。PH7.4。

• 離心結(jié)果：乳糜粒上浮，離心管傾斜，吸管貼管壁慢吸出（約占血漿容積的2~6%。禁令12小時(shí)以上供血者血漿中乳糜含量很低，食后供血者含量較高。

（五）   血清脂蛋白分離：

（ⅰ）VLDL分離（ρ<1.006g/cm³）

轉(zhuǎn)頭	離心管內(nèi)液體分布	離心參數(shù)	結(jié)果
S140AT (CS-150GXL機(jī)組)	下部600μl血漿 上部300μl A液	140，000rpm×50min 16℃ 加速：5 減速：7	可見(jiàn)明顯分層上部約1/3VLDL吸出
S80AT3 (CS-150GXL機(jī)組)	下部3.4ml血漿 上部1.7mlA液	80，000rpm×4.5hrs 16℃ 加速：5 減速：7	同上
P70AT (CP-MX機(jī)組)	下部24ml血漿 上部11.7ml A液	70，000rpm×8hrs 16℃ 加速：5 減速：7	同上