《 徹底了解生物安全柜》

力康----董永

  WHO《實驗室生物安全手冊》提出，生物安全柜可以有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實驗室感染以及培養物交叉污染。生物安全柜同時也能保護工作環境。事實上，生物安全柜更側重于保護操作人員和環境，是負壓過濾排風柜，防止操作的病原微生物擴散造成人員傷害和環境污染。

生物安全柜主要國內標準及差別；1、國內標準有：中華人民共和國國家標準GB19489-2004《實驗室生物安全通用要求》；中華人民共和國衛生行業標準WS233-2002《微生物和生物醫學實驗室生物安全通用準則》；中華人民共和國國務院令《病原微生物實驗室生物安全管理條例》；中華人民共和國醫藥行業標準YY0569-2005《生物安全柜》等；世界衛生組織 《實驗室生物安全手冊（WHO，2004年第三版）》； 建設部編制的《生物安全柜JG170-2005》的建設工業行業標準， 2005年6月1日實施；歐洲標準化委員會(CEN)頒布的EN12469:2000 «生物技術 生物安全柜性能要求»（English Version）；美國國家標準學會（American National Standard Institute, ANSI）官方認可的NSF/ANSI49-2002 «Class Ⅱ (層流)生物安全柜»（English Version）；醫務人員艾滋病病毒職業暴露 防護工作指導原則  2004；《醫院感染治理辦法》2006年；2、國內生物安全標準的區別；更嚴格的定義：的區別是EN12469只對“二級生物安全柜”有一個基本的定義，而YY0569同NSF49一樣，將二級生物安全柜依照窗口流入氣流風速、排氣方式和循環方式等分為4個類型：A1型，A2型(原B3型),B1型和B2型。YY0569和NSF49都規定過濾器完整性測試中使用的是氣溶膠噴發劑(例如DOP,PAO等)；歐洲EN12469標準（使用一樣的測試方法）使用另一種自然氣溶膠(自然空氣)測試方法。

 需要明確了解生物安全柜與通風柜/超凈工作臺的區分。通風柜和超凈工作臺不屬于生物安全柜，不可使用在涉及微生物材料的實驗或生產過程中。通風柜（通風櫥）是為在化學實驗過程中清除腐蝕性化學氣體和有毒煙霧而設計的，起到往外抽風的作用。由于沒有裝備HEPA過濾器，通風柜不能有效清除微生物介質。放置在通風柜內微生物樣品會散播到柜外，污染實驗室環境。 超凈工作臺（超凈臺）是為了保護試驗品或產品而設計的，通過吹過工作區域的垂直或水平層流空氣防止試驗品或產品受到工作區域外粉塵或細菌的污染。一旦微生物樣品放置于工作區域，層流空氣將把帶有微生物介質的空氣吹向前臺工作人員而產生危險。

生物安全柜選擇要點；1、超高效空氣過濾器對于直徑大于0.1 um~0.2um粒子,過濾效率為99.999%。力康的生物安全柜均采用超高效過濾器；2、固定風速風機：這種風機的風速是固定的，當高效空氣過濾器因堵塞而導致濾膜承載壓力加大時，需要人工調整風機的風速；自感應風機，生物安全柜能自動控制風機風速在一定范圍內根據負載的變化自動調節，保證輸出的風量在狀態以及該生物安全柜中負壓的相對穩定性。YY0569-2005生物安全柜醫藥行業標準要求安全柜的風機應保證當經過過濾器的風壓變化超過50％時，在不調整風機的電機功率情況下，經過濾器的下降氣流流量變化小于10％；3、壓力泄漏法測試：國家醫藥行業 YY0569-2005標準規定生物安全柜加壓到500Pa,保持30 min后氣壓不低于450Pa。4、中國YY0569-2005標準中規定安全柜的前窗操作口流入氣流的平均流速應為0.50m/s，對于下降氣流的平均流速應在0.25m/s和0.5m/s之間,并且要能在控制面板上實時數字顯示出安全柜的流入氣流流速和下降氣流流速。5、同時通過“生物法人員保護測試”和“KI法人員保護測試”，力康生物安全柜是采用兩種方式同時檢測；

購買生物安全柜的幾個誤區；1、超前化選型；二級生物安全柜，A2排氣量在458-687m3/h,B2排氣量在927-1854m3/h；普通家用排氣扇的排氣量約為80m3/h；室內空氣大量外排，要保證實驗室內溫度滿足實驗要求，需要空調和加熱器的負荷非常大，現已建好的實驗室根本無法滿足要求，也造成能源浪費；如果沒有足夠的補充送風，生物安全柜所在的房間成為高負壓狀態，生物安全柜無法正常工作；2、安裝問題多多；1）、A2型生物安全柜使用密閉硬管連接到帶外排風機的排風系統時，其安全運行完全依賴于排風系統，當排風系統發生堵塞時，會產生污染環境、樣品；的解決方法是接口做成開放式；2）、管道過長時，原來的標配風機已經不能達到風量的要求，所以要采用更大功率的3項風機，但是需要定風量閥及聯動裝置；另外，除了操作危險度較高的實驗對象或能產生化學氣味的化學試劑，二級A2生物安全柜排風排到室內是安全可行的；

生物安全柜檢測之重要性；目前無有資質的機構統一開展生物安全柜的檢測工作，有些用戶只要生物安全柜能轉，就一直用下去，成為很大的隱患；生物安全柜安裝完畢、移動位置后、檢修后、更換過濾器后進行現場檢測；生物安全柜是操作微生物的直接場所，生物的安全與否直接由生物安全柜決定，這就要求廠家及客戶人員定期對生物安全柜進行生物安全氣流、過濾器泄露、潔凈度、風速以及紫外燈光照度的檢測，分年檢、出廠檢測、安裝檢測三類；力康—HealForce每年定期對客戶做年檢服務并且保證每一臺出廠的生物安全柜都有合格的檢測報告，并且在安裝時還可以做安裝檢測，這就有效地保證了設備的生物安全。

生物安全柜在使用時的注意事項；在使用生物安全柜時必須穿個人防護服，戴手套（手套應套在隔離衣的外面），根據需要帶防護眼罩或者面罩。開機5分鐘內不可操作，安全柜要有個自凈的過程；操作時盡量緩緩移動手臂，安全柜的擺放位置盡量遠離走道，避免氣流波動；操作樣品時分潔凈區、操作區、污染區分開擺放物品；柜內盡量避免震動儀器（例如離心機、旋渦振蕩器等）的使用，因為震動會使得積留在濾膜上的顆粒物質抖落，導致操作室內部潔凈度降低，同時如果在前操作面平衡失敗還會引起安全柜對操作者的污染。物品不要擋住負壓通道，以免造成氣流混亂；明火可造成生物安全柜的氣流紊亂，干擾氣流模式；用70%的酒精徹底對安全柜內部工作區域表面、側壁、后壁、窗戶進行表面凈化。盡量不要用含有氯的殺菌劑，因為它可能對安全柜的304不銹鋼結構造成損壞。必要時對紫外燈和電源輸出口表面進行清潔。當清潔安全柜內部區域時，操作人員除了手以外，身體的其他任何部位不能進入安全柜，如果有污物流入積液槽要及時進行清理；每天實驗結束后，對生物安全柜的內壁和臺面進行擦拭，等待5分鐘后，關閉前窗，關燈，關風機，紫外燈照射30分鐘后關閉系統電源。合理定期的維護對維護任何設備的正常工作都是至關重要地，對安全柜進行維護，保持其性能。每次開機/關機均應按照SOP文件記錄相關運行參數。